小鼠口服氯化钠的急性毒性实验

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1、小鼠口服氯化钠的急性毒性实验丁**（***学院*****专业******班2*************）摘要：研究氯化钠溶液对小鼠的急性毒性，学习动物实验的基本实验方法，掌握经口灌胃技术，学习半数致死剂量（LD50）的计算及毒性判定。选用SPF昆明小鼠，经口灌胃两次给药,统计死亡率，用改良寇氏法计算半数致死量(LD50)，并观察毒性作用。结果氯化钠对小鼠的口服LD50为8.48g/kg，95%可信区间为8.32g/kg～8.64g/kg。表明氯化钠属于低毒性的物品，在日常生活中可正常适量食用。关键词：氯化钠

2、；SPF昆明小鼠；口服；急性毒性；半数致死;LD50作为烹饪调料的主要材料之一，氯化钠在生活中的用途无处不在，我们的生活已经和氯化钠紧紧联系在了一起。这就造成了人们普遍以为氯化钠是“无毒”的。这其实是一个错误的认识，氯化钠其实并不是大家所认为的“无毒”。为了探究氯化钠急性毒性的级别，本实验采用SPF昆明小鼠作为实验对象，进行口服氯化钠的急性毒性实验，根据实验结果，采用改良寇氏法计算半数致死量，得出氯化钠的毒性等级。1材料与方法1.1实验动物小鼠SPF昆明小鼠37只，小鼠体重要保证组内差异<20%（20～24

3、g），雌雄各半，保证雌性未产、无孕。饲养前需要对小鼠的饲养房、笼具、饮水瓶等进行消毒。小鼠饲养在方形透明鼠笼中，保证充足的饮水和食物。实验前饲养2～3天，以适应实验环境，并观察其正常生长活动和健康状况。给药前禁食处理--空腹过夜（不禁水）。1.2药物氯化钠。查阅相关资料文献后，我们得知氯化钠的LD0为200mg/kg，LD50为4000mg/kg，因此我们设定LD100为8000mg/kg，分为5个实验组，组距为：i＝(lg8000-lg200)/4=(3.9-2.3)/4=0.4，r=（n-1）√（LD1

4、00/LD0）=4√（8000/200）=2.51，因此得到各组剂量设计见表1：表1各组剂量分配结果配制氯化钠溶液时，我们考虑到小鼠的灌胃容量约为0.4ml/只，需要配制的溶液浓度＝最高剂量/灌胃容量，实际需要溶液的量为：V＝最低体积＋耗量＝动物数×灌胃量＋耗量，由此可得各组的溶液配制情况见表2：表2各组溶液配置情况1.3方法1.3.1分组和标记将小鼠按照随机分组的原则分成6组，每组雌雄各半，经过对染色法、耳缘孔口法、烙印法、挂牌法等方法的比较后，我们决定采用染色法对各组小鼠进行标记。染色法就是用不同颜色的

5、染料涂擦于动物不同部位来表示不同号码。染色剂采用甲基紫酒精饱和液，按左前肢、左肋、左后肢、颈部、背中、尾根、右前肢、右肋、右后肢的顺序编号为1～9号，并对应于各小组成员。1.3.2灌服和观察我们实验组Ⅴ组由于需灌胃量大，在小鼠胃的一次性容量之外，所以分两次灌胃，两次灌胃间隔半小时。灌胃前禁食8h，但不限制饮水。小鼠灌胃的方法：（1）左手拇指和食指捏住小鼠头部两耳后皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手上，使小鼠腹部向上，尽量使其身体垂直，即使上消化道成一直线；（2）右手持连着灌胃导针的注射器，将灌胃针由动物口角插

6、入，避牙齿、舌头，贴咽后壁缓缓滑入食管。若遇阻力，可轻轻上下滑动探索，一旦感觉阻力消失，即深入胃部，一般进针深度2.5～3cm；（3）将盐水轻轻注入胃中。（4）如遇动物挣扎，应停止或将针拔出，千万不能强行插入，以免刺伤食管或内脏。灌胃后及时观察小鼠的临床症状，是否有异常行为、异常生理变化。之后的7天每天都要观察小鼠的活动情况。1.3.3体重、采食和饮水每天用电子称称取每只小鼠的体重、食料重量及饮水重量，记录小鼠每日体重、采食量及饮水量。记录数据见表3：表3实验组第Ⅴ组小鼠体重、饮水量及采食量数据记录表记录时

7、间小鼠体重（g）饮水量（g）采食量（g）12345677日晚232022.518.521.51919008日晚X182116.519.517.51729219日早X20191721.517171679日晚X20X16.5201817106.510日晚X21X16.52119X17.517.511日晚X23.5X18.522.521X24.519.512日晚X24.5X2123.522X24.516.513日晚X26X21.524.524X271614日晚X28X23.52625X3014.5注：X表示小鼠已

8、死亡。1.3.4解剖对死亡小鼠或者直到实验最后一天依然存活的小鼠进行解剖。解剖方法：（1）将小鼠腹部朝上平放在解剖盘里，用镊子在小鼠的后肢之间处夹起毛皮，用解剖剪剪开一个口，从剪口处用双手分别同时向首尾方向撕开小鼠毛皮；（2）用镊子在小鼠的后肢之间处夹起内层皮，用解剖剪从中间分别向两侧斜上方剪开，用双手将小鼠内层皮撕开，即可看到小鼠腹腔；（3）剪开小鼠肋骨即可看到小鼠胸腔。解剖后观察小鼠的各个器官，尤其是药物作用