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《病理学论文：胃印戒细胞癌的细胞起源及其癌前病变的病理学》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、病理學論文：胃印戒細胞癌的細胞起源及其癌前病變的病理學摘要目的:研究胃印戒細胞癌的發生與胃腺增殖區的關係,探討其細胞起源和癌前病變.方法:以42例早期胃印戒細胞癌為研究對象,觀測其組織形態,採用免疫組織化學雙染標記癌灶內分化標誌物MUC5AC和MUC6的表達情況,檢測癌灶不同區域Ki-67以及胃腸道幹/祖細胞標誌物musashi-1的表達差異,並與癌旁胃腺進行對比.結果:早期胃印戒細胞癌具有特徵性的分層結構.該結構分為兩層,淺表層為典型的印戒細胞,體積大,胞質豐富,基底層為原始的癌細胞,體積小,核/漿比大;在形態和解剖定位上,基底層癌細胞與癌
2、旁胃腺增殖區細胞類似,免疫組織化學顯示其MUC5AC、MUC6表達均為陰性,或僅微弱表達MUC5AC,而Ki-67、musashi-1表達率顯著高於淺表層印戒細胞(t=31.0和22.8,P<0.01);基底層癌細胞可向淺表層印戒細胞分化過渡,這與增殖區細胞向胃小凹上皮分化的過程相似;癌旁可見胃腺增殖區細胞異型增生,其表型與分層結構基底層癌細胞一致.結論:胃印戒細胞癌可能起源於增殖區MUC5AC-/lowMUC6-的胃小凹前體細胞,同時增殖區的異型增生是此類胃癌的癌前病變.關鍵字:胃腫瘤;印戒細胞癌;腫瘤發生;免疫組織化學0引言基於臨床病理特
3、徵的不同,胃癌可分為腸型和彌漫型兩類[1].近年的流行病學調查顯示,胃癌的總體發病率已明顯下降[2],但彌漫型胃癌尤其是印戒細胞癌的發病率卻顯著升高[3],因此這類胃癌也受到越來越多的關注.迄今,胃印戒細胞癌的早期診斷率不高,一個重要原因是對此類胃癌的病理形成機制和癌前病變尚不清楚.胃印戒細胞癌與腸型胃癌相似,起源於胃黏膜上皮.組織學上,胃黏膜的基本結構單位是胃單元(gastricunits),該結構為單克隆起源[4],由胃小凹和胃腺組成,其中胃腺又依次分為峽部、腺頸和基底部.胃腺的峽部以及腺頸上部的細胞增殖活躍,被稱為增殖區.研究證實,增殖
4、區是胃印戒細胞癌起源的部位[5].然而,這一區域實際上含有多種低分化細胞,並具有不同分化方向[6,7],印戒細胞癌究竟起源於增殖區的何種細胞,目前尚不清楚.為探討這一問題,本研究以早期胃印戒細胞癌為觀測模型,採用免疫組織化學雙染的方法,觀測了早期腫瘤細胞的空間分佈、分化表型和增殖特性,希望為認識此類腫瘤的細胞起源及其癌前病變提供新的病理學依據.1材料和方法1.1材料回顧我院1988-2008年以及無錫市第三人民醫院2007-2008年手術切除的胃癌根治標本約2200例,根據最新WHO國際腫瘤病理分類對胃印戒細胞癌的病理診斷標準(印戒細胞占癌細
5、胞總數的50%以上),以及早期胃癌的診斷標準(癌細胞浸潤深度不超過黏膜下層),共確認42例早期印戒細胞癌標本作為研究對象,患者年齡30-77歲,其中男25例,女17例,均無家族史;腫瘤分期:24例為T1a期,局限於黏膜內;18例為T1b期,累及黏膜下層.對所有標本的存檔蠟塊連續切片(厚3μm),蘇木精-伊紅(HE)染色.另取10例正常胃黏膜作為對照.1.2方法1.2.1免疫組織化學染色:採用免疫組織化學雙染標記MUC5AC和MUC6陽性細胞,其中MUC5AC主要表達於胃小凹、峽部和腺頸部的黏液細胞[8](抗體購自福州邁新公司,為工作液),MU
6、C6則局限於腺頸的黏液細胞和基底部的幽門腺上皮[8](濃縮抗體購自上海長島公司,稀釋度1∶50),此二者常被用來作為胃上皮分化的標誌物.操作按產品說明書進行,並根據文獻略有改變[9],步驟簡述如下:石蠟切片脫蠟至水;檸檬酸緩衝液(pH6.0)95℃修復10min,保溫10min;3%H2O2室溫孵育後血清封閉10min;而後採用SP法先標記MUC6,顯色系統為BCIP/NBT,陽性呈藍黑色,定位於細胞質;隨後再次進行抗原修復,目的為暴露MUC5AC抗原,同時滅活前一次染色時殘留抗體的免疫活性,抗原修復方法同前.採用SP法標記MUC5AC,顯色
7、系統為HRP/AEC,陽性部位呈紅色,定位於細胞質.另取連續切片單獨標記Ki-67(抗體購自福州邁新公司,為工作液)和musashi-1(SantaCruz公司,濃縮液,稀釋度1∶100),其中musashi-1為一類RNA結合蛋白,與幹細胞的不對稱分裂有關[10],是神經幹細胞和胃腸道幹/祖細胞的標誌物[11-13].染色仍採用SP法,顯色系統為HRP/DAB,陽性部位呈棕黃色,定位於細胞核.陰性對照採用PBS替代一抗與切片孵育,其餘操作相同.1.2.2不同區域印戒細胞平均Ki-67、musashi-1陽性細胞比例的測定及比較:免疫組織化學
8、染色標記Ki-67、musashi-1後,檢測不同區域陽性癌細胞的比率.每例標本測定兩個區域:癌灶靠近黏膜表面上皮的淺表部分和浸潤最深的部位.每個區域隨機選取5個視
