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《中国恒河猴mhc ⅰ型部分等位基因的分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国恒河猴MHCⅠ型部分等位基因的分析第28卷第3期2011年6月实验动物科学LAB0RAT0RYANIMALSCIENCEVo1.28No.3June2011研究?论着易,谚中国恒河猴MHCI型部分等位基因的分析季芳张艳春李学家张秀娟彭白露金石军刘晓明(1.广东省昆虫研究所,广州510260)(2.广东蓝岛生物技术有限公司,广州510555)摘要:目的对中国恒河猴主要组织相容性复合体(MHC)I型部分基因进行携带情况调查与分析.方法采用序列特异性引物(PCR—SSP)分型方法对华南灵长类动物研究中心繁
2、殖的3O只谱系清晰的中国恒河猴(Macacamulatta)的32个MHCI型分子位点进行检测.结果采用的32对引物中,中国恒河猴可检出携带23个MHC,I等位基因,但基因携带频率存在很大的差异,由3.57%至82.14%不等.结合遗传谱系分析,判断A121和A2}05之间以及B04和B30之间可能就是连锁的.结论中国恒河猴携带能控制病毒复制的MHCI型基因位点的频率较高,其基因携带频率与已发表的印度恒河猴携带频率存在明显差异.本研究为促进中国恒河猴在AIDS研究中的应用,以及为建立携带特定MHCI基因
3、实验猴小种群提供了依据.关键词:MHCI型;中国恒河猴;PCR—SSP中图分类号:文献标识码:A文章编号:1006—6179(2011)03-0042-05主要组织相容性复合体(majorhist0compatibi1itycomplex,MHC)由3类组成,其中I类位点与细胞毒性T细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)作用相关,它的复杂性和多态性使得个体间的免疫应答有所不同….猴免疫缺陷病毒(SIV)感染的恒河猴是研究艾滋病(AIDS)的常用的动物模型,MHC-I的多态性很大程度上影
4、响了用其作为动物模型的实验研究结果的可靠性和可重复性.已有的实验证明Mamu.A01和B17与SIV感染的病程控制有很大关系.因此,清晰的遗传背景对于实验结果的解释和疫苗效果的评价有重要意义.另一方面,MHCI类分子等位基因的鉴定是指导实验猴定向培育的基础.根据MHCI单倍型连锁遗传的特点,对子代的进一步近交和扩大繁育,就可以达到MHCI类分子遗传背景均质性的群体.在此基础上建立的MHCI类分子肽四聚体技术,是研究细胞免疫应答有效而特异的方法,可极大推动实验猴在艾滋病研究中的应用.本研究在前期对247只
5、中国恒河猴5个MHC—I型基因的分析基础上,根据国外已经发表的对洹河猴感染SIV影响疾病进程的MHCI基因序列,通过PCR-SSP(PCRamplificationwithsequence.specificprimers)测定中国恒河猴32个MHCI类分子等位基因的携带情况,并结合其遗传谱系,分析MHCI等位基因的分布和基因连锁情况,为建立携带特定基因组成的恒河猴小种群提供依据.1材料和方法1.1实验材料恒河猴30只,均来自广西群,有清晰的谱系记录.分2群饲养,由华南灵长类动物研究开发中心提供.生产许可
6、证号(SCXK(粤)2009—0010).笼(规格:内外室的建筑面积之和为20～25m)饲养,饲养室温度16～29℃,相对湿度50%～80%.饲料为实验猴专用饲料,人工喂养,每日辅加时令水果,自由饮水.BioRadPCR仪,Alphaimagine2200凝胶图象分析系统(AlphaInnotech公司);PCRLA.Taq酶,dNTPs(购自宝生物公司),DL2000Marker(购自全式金生物公司),血液基因组提取试剂盒(购自外显子公司);引物设计参考已发表的印度恒河猴引物资料,见表1,其中DRB为
7、内参位点,由上海生工合成.收稿日期:2010—08—24'基金项目:广州市重大科技专项(穗科条[2008]41);广州市重大科技专项(No:2009A1一E051);广东省科技计划项目(No:2010B060500023)作者简介:季芳(1978一),女,助理研究员.研究方向:灵长类实验动物学.E-mail:fang_0818@yahoo.corn.ca通信作者:刘晓明,E-mail:xemoonliu@hotmail.tom第3期季芳等:中国恒河猴MHCI型部分等位基因的分析?43?lA}016852
8、A02lO183A047004A086ll5Al16886A$l36697A1{217008A2058009A2{24400lOB}01630B}03l445B041368B07638B081096Bl2624B17700B$2170018B$26l00019B}2748020B2840021B3040022B4575023B4656O24B4770025B{4950026B657O027B687O028B7550029B69016003O
