中国恒河猴（macaca mulatta）外周血

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1、中国恒河猴（Macacamulatta）外周血【摘要】　　目的:对正常中国恒河猴(Macacamulatta)及嵌合猿猴/人免疫缺陷病毒（SHIV）感染过的中国恒河猴外周血中CD4+IL17A+和CD4-IL17A+T淋巴细胞的分布频率进行初步观察。方法:用荧光染料标记的单克隆抗体（mAb）对10只中国恒河猴的外周血或PMA+Ionomycin刺激后的PBMC细胞表面的CD3、CD4、CD8及细胞内IL17A进行免疫荧光染色。用FACScalibaur获取染色后的样品,所得数据用CellQuest进行分析。结果:在6只正常中国恒河猴个体中均能检测到IL17A+淋巴细胞,未经刺激培

2、养的样品中IL17A+细胞频率很低,但在短期刺激培养后淋巴细胞中具有约1.4%的淋巴细胞为IL17A+细胞,明显多于刺激前的IL17A+淋巴细胞;在短期刺激培养后CD3+CD4+淋巴细胞中大约有2.7%的IL17A+细胞或CD4+Th17细胞。对4只SHIV感染个体中Th17细胞的初步分析未发现它们与正常个体间的统计学差异。结论:与人类相似,中国恒河猴的外周血中也存在一定比例的Th17细胞,为进一步利用恒河猴AIDS动物模型分析HIV/AIDS与Th17细胞的关系提供了基础。【关键词】中国恒河猴外周血单个核细胞IL17A+细胞CD4+Th17猿猴/人免疫缺陷病毒感染　　[Abst

3、ract]AIM:ToobserveCD4+IL17+cellsintheperipheralbloodofChineserhesusmacaques.METHODS:PeripheralbloodsamplesnormalandSHIVinfectedrhesusmacaques.SurfaceCD3,CD4,CD8andintracellularIL17Aexpressionofperipheralblood(ycinstimulation)munostainingelabeledmonoclonalantibodies.Thesamplesalrhesusmacaquesbut

4、thereycin.About1.4%oflymphocytesulationandshorttermcultivation,andabout2.7%ofCD3+CD4+lymphocytesonkeysined.ThenumberoftheTh17cellsdetectedafterstimulationandshorttermcultivationthatofnormalmonkeys.CONCLUSION:Similartohumanrace,ChineserhesusmacaquespossessasubsetofCD4+IL17A+cells,suggestingthes

5、erhesusmonkeycanbeusedtostudytherelationshipbetacaque;PBMC;IL17A+cell;CD4+Th17cell;SHIVinfection　　在对鼠类实验动物的研究中发现,鼠类动物未接触抗原的CD4+T淋巴细胞在抗原激活后能够分化产生不同表型和功能的辅助性T淋巴细胞。CD4+辅助性T淋巴细胞(Thelper,Th)因表达不同种类的细胞因子而被人为地分成了多个不同的细胞亚群[1,2],其中研究最多的是Th1和Th2这2个细胞亚群,前者表达IFNγ和TNFα等细胞因子,主要与清除细胞内病原体的细胞免疫应答密切相关;而后者主要表达I

6、L4、IL5和IL13等细胞因子,是清除细胞外病原体的体液免疫应答所必需的辅助性T淋巴细胞。近年来一系列的研究表明CD4+T淋巴细胞中还存在另外一个亚群的辅助性T淋巴细胞,它们表达白细胞介素17(IL17),称为Th17,是与Th1和Th2都明显不同的淋巴细胞亚群,主要在诱导自身免疫性组织损伤中发挥作用[1-3]。这些功能正好与CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的功能相反,后者主要具有抑制自身免疫反应及组织损伤的作用[4]。虽然大多数研究表明Th17主要与自身免疫性疾病和炎性疾病,如类风湿性关节炎、哮喘和实验性自身免疫脑脊髓炎等的病理发生密切相关,但已有研究表明Th17细胞也在感

7、染免疫中具有一定的作用[5]。人体免疫系统具有与小鼠类似的辅助性T淋巴细胞亚群,包括Th1、Th2和Th17细胞[6]。Maek等[7]在对40名未经治疗无症状的HIV1感染者外周血Th17细胞的研究中发现HIV1感染者具有较多的Th17细胞,表明这些细胞可能与艾滋病的病理过程相关,但具体作用尚不清楚,需深入研究。恒河猴(Macacamulatta)是艾滋病研究的首选实验动物之一,已经在艾滋病病理、药物和疫苗研究中广泛使用,可能