中国恒河猴（macaca mulatta）外周血th17细胞及其在shiv感染后的变化

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1、中国恒河猴（Macacamulatta）外周血Th17细胞及其在SHIV感染后的变化【摘要】　　目的:对正常中国恒河猴(Macacamulatta)及嵌合猿猴/人免疫缺陷病毒（SHIV）感染过的中国恒河猴外周血中CD4+IL17A+和CD4-IL17A+T淋巴细胞的分布频率进行初步观察。方法:用荧光染料标记的单克隆抗体（mAb）对10只中国恒河猴的外周血或PMA+Ionomycin刺激后的PBMC细胞表面的CD3、CD4、CD8及细胞内IL17A进行免疫荧光染色。用FACScalibaur获取染色后的样

2、品,所得数据用CellQuest进行分析。结果:在6只正常中国恒河猴个体中均能检测到IL17A+淋巴细胞,未经刺激培养的样品中IL17A+细胞频率很低,但在短期刺激培养后淋巴细胞中具有约1.4%的淋巴细胞为IL17A+细胞,明显多于刺激前的IL17A+淋巴细胞;在短期刺激培养后CD3+CD4+淋巴细胞中大约有2.7%的IL17A+细胞或CD4+Th17细胞。对4只SHIV感染个体中Th17细胞的初步分析未发现它们与正常个体间的统计学差异。结论:与人类相似,中国恒河猴的外周血中也存在一定比例的Th17

3、细胞,为进一步利用恒河猴AIDS动物模型分析HIV/AIDS与Th17细胞的关系提供了基础。【关键词】中国恒河猴外周血单个核细胞IL17A+细胞CD4+Th17猿猴/人免疫缺陷病毒感染　　[Abstract]AIM:ToobserveCD4+IL17+cellsinthe14peripheralbloodofChineserhesusmacaques.METHODS:PeripheralbloodsampleswerecollectedfromnormalandSHIVinfectedrhesusmacaq

4、ues.SurfaceCD3,CD4,CD8andintracellularIL17Aexpressionofperipheralblood(withorwithoutPMA+Ionomycinstimulation)weredetectedbyimmunostainingwithfluorochromelabeledmonoclonalantibodies.ThesampleswereacquiredwithFACScaliburandthedatawereanalyzedwithCellQuest.RE

5、SULTS:IL17A+cellswereobservedinallthe6normalrhesusmacaquesbuttherewereveryfewbeforeculturedwithPMA+Ionomycin.About1.4%oflymphocyteswereIL17A+cellsafterstimulationandshorttermcultivation,andabout2.7%ofCD3+CD4+lymphocyteswereIL17A+cells,i.e.CD4+Th17cells.

6、Th17cellsinthe4SHIVinfectedrhesusmonkeyswerealsoexamined.ThenumberoftheTh17cellsdetectedafterstimulationandshorttermcultivationwasnotsignificantlydifferentfromthatofnormalmonkeys.CONCLUSION:Similartohumanrace,ChineserhesusmacaquespossessasubsetofCD4+IL17A

7、+cells,suggestingtheserhesusmonkeycanbeusedtostudytherelationshipbetweenTh17cellsandHIV/AIDS.　　[Keywords]Chineserhesusmacaque;PBMC;IL17A+cell;CD4+Th17cell;SHIVinfection14　　在对鼠类实验动物的研究中发现,鼠类动物未接触抗原的CD4+T淋巴细胞在抗原激活后能够分化产生不同表型和功能的辅助性T淋巴细胞。CD4+辅助性T淋巴细胞(Thelper

8、,Th)因表达不同种类的细胞因子而被人为地分成了多个不同的细胞亚群[1,2],其中研究最多的是Th1和Th2这2个细胞亚群,前者表达IFNγ和TNFα等细胞因子,主要与清除细胞内病原体的细胞免疫应答密切相关;而后者主要表达IL4、IL5和IL13等细胞因子,是清除细胞外病原体的体液免疫应答所必需的辅助性T淋巴细胞。近年来一系列的研究表明CD4+T淋巴细胞中还存在另外一个亚群的辅助性T淋巴细