糖化血红蛋白测定与影响因素的研究进展

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1、糖化血红蛋白测定与影响因素的研究进展【摘要】糖化血红蛋白（GHbA1c）水平的高低能够对临床患者的血糖控制程度进行可观的反应，是临床对患有糖尿病患者的血糖进行检测和对其临床治疗效果进行评价的黄金标准。到目前为止临床实验室对该项指标水平进行检测的有效方法总共有30余种，根据这些方法在检测时的反应原理的不同，我们可以人为的将其分为两大类，第一类是以机体内的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白所带的电荷不同为原理进行检测的方法，第二类是以糖化血红蛋白的结构特点为依据所进行检验的方法。本文对能够对上述方法的检测结果构成影响的相关因素进行综述性介绍。【关键词】糖化血红蛋白影响

2、因素研究进展糖化血红蛋白(GHbA1c)是对患者在3个月内的机体平均血糖水平进行客观反映的一项重要指标,与患有糖尿病的患者出现并发症现象的危险有着十分密切的关系[1]。糖尿病是由遗传和环境等因素相互作用而导致的一种临床上比较常见的疾病,会导致患者的视网膜、肾、神经等出现相应的病变及各种并发症现象,在临床上该类患者主要以高血糖现象为主要的临床表现,病情严重时可危及到患者的生命[2]。因此及早发现糖尿病迹象,及时进行有效的治疗显得尤为重要,对患者机体的糖化血红蛋白水平进行测定对于该类患者的诊断和疗效评价有着非常重要的意义[3]。根据糖化血红蛋白检测方法在检测时的

3、反应原理的不同，我们可以人为的将其分为两大类，第一类是以机体内的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白所带的电荷不同为原理进行检测的方法，第二类是以糖化血红蛋白的结构特点为依据所进行检验的方法[4]。现对能够对上述方法的检测结果构成影响的相关因素进行综述性介绍如下。一、检验方法GHb的测定方法的原理有多种:①根据GHb与Hb的电荷差异,如离子交换层析、高效液相层析(HPLC)、电泳和等电聚焦电泳;②根据Hb上糖化集团结构差异,如亲和层析、免疫测定法、离子捕获法和酶法;③化学分析,分光光度法、比色法。二、L-A1c对检测的影响L-A1c是GHb在进行初期反应时所产生的一

4、种产物,结构不是十分稳定,会随血糖浓度的变化而变化,可水解为葡萄糖和Hb,也可生成更稳定的醛胺。该物质不能对平均血糖的浓度进行反映,但可对GHb的测定结果产生影响[5]。硼酸盐亲和色谱法和免疫法不对L-A1c进行检测,所以不会受其影响[6]。离子交换色谱法和电泳法受该物质的影响相对较大,有研究发现该物质可使离子交换色谱法测定得到的GHb值比实际值高出1.5%左右[7]。最简单去除该物质的方法是将样本用溶血剂进行处理,将溶血产物在37摄氏度患者中孵育6个小时左右[8]。三、Hb变异体对检测的影响HbF不会对离子交换色谱法和亲和色谱法的检测结果产生影响,而免疫法

5、易受到HbF的干扰。研究发现即使HbF浓度在15%以上,Bio-RadVariantⅡ和TosohG7两种离子交换层析柱也不会受到太大的影响[9]。但CLC330/385亲和层析柱法的测定结果会比实际值低,尤其当HbF在20%以上时,测得的GHb值会下降1%左右甚至更多。该物质对CLC330/385亲和色谱法所产生的干扰比较到,可能是由于HbF的糖化速率相对较慢。HbF可以使DCA-2000免疫法的测定值较实际值低,因为在HbF分子中HbA的β链被γ链所取代[10]。四、常见的化学衍生物对检测结果的影响氨基甲酰Hb在患有尿毒症的患者血液中的浓度会明显升高,是

6、最常见的对GHb检测结果造成干扰的化学衍生物[11]。尿素在患者体内可自发形成氨和氰酸盐化合物,氰酸盐经过质子化作用后可以形成异氰酸,该产物与蛋白质的α和ε氨基基团反应可以形成氨基甲酰。Hb的β链的N端上的缬氨酸与异氰酸发生结合反应形成氨基甲酰Hb[12]。该物质与HbA1c的等电点比较相似,故可对依据电荷原理对GHb的水平进行测定的方法形成一定的干扰。电泳法对氨基甲酰Hb的反应非常敏感。在患者的体内,氨基甲酰化的Hb的浓度如果在5.4%以上时，就会导致采用离子交换法测定得到的GHb值比真实偏高[13]。五、影响红细胞生存时间的因素对检测结果的影响GHb在患

7、者的红细胞内的合成进程是连续进行的但是速度一般情况下比较缓慢,任何能够导致机体内的红细胞寿命明显缩短的一种疾病都会使GHb形成的时间显著缩短,使得检测所得到的最终结果受到一定程度的影响。由于某些基础性疾病多导致的继发性溶血现象，往往会导致该项检测所得到的最终结果明显偏低,例如患有肝硬化、脾肿大、糖尿病等疾病的患者。采用EPO进行治疗及处于极度贫血状态下的患者采用输血的方法进行治疗也会对GHb的检测结果造成很大的影响[14]。测定方法不同对糖化血红蛋白的检测结果所产生的干扰也不同。维生素C和维生素E可对Hb的糖基化产生十分明显的抑制效果,使测定所得到的最终结果

8、出现假性降低现象。相关研究结果显示，患有缺铁性贫血的