东半区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究

东半区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究

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1、东半区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究第21眷第1期vd.21No.1植物研究IULLETINOFBOTANICALRESEARCH20∞年1月Jan.,2001东北地区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究'宋志文曹军杨光(1.中国科学院沈阳应用生态研究所,沈阳110015)(2哈尔滨制药三厂,哈尔滨150010)摘要采用过氧化枷酶同I酶聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱作为遗传标记.结合开;态学,细胞学及野外居群调查等I作,对东北地区野豌豆属植物进行深入研究.结果表明分子资料基表上同态学,细胞学研究取得比较一致的结果.对一些在分类上有争议的类群提出7处理意见.并推测7诚

2、属内一些多倍体的起源方式.关键词过氧化枷酶同I酶;野豌豆属;居群STUDIESONPER0XIDASEIS0ZYMEOFV.rc【4L.INNORTHEASTCHINASONGZhi—weftCAOtunYANGGuang2(I.InstituteofAoNiedEcology,Academia~nica,shemyan8110015)(2.HarbinThirdpharmaceuticalmamIfBct..Harbin150010)AbstractBymeansofpolyacrylamidegdelectrophore~is.peroxidaseis

3、ozyme0fViciaL.Speciesdjstributedinnortheastoichinawasanalysed.Inconjunctionwiththeworksoimorphology.cytdo—gYandpopulationinvestigationtheresultsshowedthatmoleculardatawereingeneralinagreementwiththestudiesofmorphologyandcytology.Taxonomictreatmentsweregiventosomecontroversialspeci

4、esandoriginsofsomemulti【pIoidswereguessed.KeywordsPemxidaseisoenayme;ViciaL.;Populatlon1引言野豌豆属(VicLa)是林奈1753年根据模式种ViolaSativa建立的,至今垒属大约有150种,主要分布于北温带和南美.我国约有40种.南北均产.自从该属建立以来,国外一些学者先后对其进行了分类学,解剖学,细胞学和花粉学的研究.进入六十年代后.针对一些有经济价值的种类.开展了植物化学,植物生物化学,植物生理学和杂交育种方面的工作.国内对野豌豆属植物研究较少,主要是一些经典分

5、类学方面的工作,并对个别种类作丁核型分析【lJ.近年来.李瑞军等对我国东北地区的该属植物进行了广泛的野外居群调查和染色体方面的研究,发现该属内存在许多问题.很有深入研究的必要[12].目前,同工酶已广泛应用于生物学研究的各个领域.在植物系统发育与进化研究中.常用于估计种内居群间,居群内基因频率的变化.估算种问,种内分化程度.分析种内亲缘关系等.奉文以过氧化物酶同工酶作为遗传标记.通过聚类分析.结合形态学和细胞学研究,阐明东北地区野豌豆属植物的亲缘关系.并探讨过氧化物酶同工酶酶谱在该属内的分类价值..收磊据磊宴!专文(】96一男?博士研究生?工程师.现从事环

6、境生物学方面研究.植物研究2材料与方法野外采集成熟植物种子.实验室内萌发后,砂土培养幼苗,待生出两枚真叶时.取幼苗洗净,用滤纸吸去水份,置预冷研钵中按1.5~2.0mVg比例加入0.05mol/LTris—HclpH8.8缓冲液,研磨,经6.000rpm离心15分钟,取上清液,加入同体积的40%蔗糖.冰箱一20℃保存备用.聚丙烯酰胺凝胶电泳采用高pH不连续系统,浓缩胶浓度2.5%,分离胶浓度7%,电极缓冲液为Tris—GlypH8.3.点表lTable1样量50u1.30MA定电流条件下电泳6小时,电泳完毕后采用醋酸联苯胺方法染色.3结果与讨论本实验共分析

7、了东北地区野豌豆属植物8种2变种22个居群(见表1)的过氧化物酶同工酶,酶谱见图1,从结果中可以看出,大部分谱带位于酶谱上方(靠近阴极),其中谱带A,B,C,D着色较深,出现的频率也较高.用于实验的居群Populationsusedinexperiments同工酶是基因表达的产物,是分子水平的表现型.因此同工酶表现型的差异在某种程度上可能反1期宋志文等:东北地区野豌豆属植物过氧化物酶同工酶研究133映了基因型的差异.从基因型差异程度就能显示出种问或居群间亲缘关系的远近.Vaugb.an等(1968)提出用酶谱相似度系数(Similarityindexval

8、ue)来推测种间的亲缘关系,相似度指数愈高.亲缘关系愈近.相似度指

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