菟丝子多糖提取工艺优化及其对脂质过氧化的影响论文

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1、菟丝子多糖提取工艺优化及其对脂质过氧化的影响论文张丽娟，张宜欣，古同男，周秀艳【摘要】目的优选菟丝子多糖提取的最佳工艺并探讨菟丝子多糖在应激状态下对小鼠脑组织脂质过氧化物反应的影响。方法采用正交实验设计方法优选最佳工艺；比色法测定小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果影响菟丝子多糖提取率的主要因素为提取温度与料液比；不同剂量的菟丝子多糖均能降低MDA的含量(P0.05),并能增加SOD的活性(P0.05)。结论菟丝子多糖最佳提取工艺为超声提取，料液比为1∶15，提取温度为80℃，提取时间为60min；菟丝子多糖具有

2、抗脂质过氧化保护脑组织的作用。【关键词】菟丝子；多糖；提取工艺；脂质过氧化Abstract:ObjectiveTooptimizeandestablishtheextractiontechnologyofSemencuscutaeandtoinverstigateitsanti-peroxidationeffectsontheirritatedmousebraintissues.MethodsTheorthogonaltestployedtotesttheeffectsofthethreefactorsincludingvolumeofpe

3、ratureofextrctionandtimeofextration.Theextractiontechnologyized.Malondialdehyde(MDA),superoxidedismutase(SOD)inthebraintissueseasuredbycolorimetry.ResultsTheextractiontemperatureandvolumeofSemencuscutae(P0.05),.freelumprocessisutrasonicextractionandtheconditionisasfolloper

4、atureis80℃,extractiontimeis60minutes.PolysaccharidesfromSemencuscutaehasanti-lipidperoxidationencuscutae;Solublepolysaccharides;Extractiontechnology;Lipidperoxidation菟丝子为常用补益中药，具有补肝肾.freel.的干燥成熟种子，但在市场上其同属植物南方菟丝子CuscutaaustralisR.Br.)已成为商品药材的主流品种［2］。近年来，菟丝子的研究多集中在对其黄酮类［3，4

5、］和多糖［5，6］成分的研究，但利用超声提取菟丝子多糖的方法尚未见报道。脑组织脂质含量高，易受氧化损伤，有研究表明，脂质过氧化物在脑损伤的病理过程中起重要作用。本文采用正交分析的方法，设计并优化了菟丝子多糖超声提取工艺；并利用耐力游泳造成应激动物模型，通过测量脑组织SOD和MDA的含量，探讨菟丝子多糖对应激小鼠脑组织脂质过氧化物的影响。1仪器与材料1.1仪器TCQ-250超声波清洗器；UV2000紫外－可见分光光度计；LD4-2低速离心机；TGL-16G台式高速离心机；旋转蒸发仪；JA12002电子天平。1.2药材菟丝子药材购自北京同仁堂，

6、经中国医学科学院药物研究所龚宁波鉴定为CuscutaaustralisR.Br.的干燥成熟种子。1.3动物昆明种雄性小鼠，体重（22.0±2.3）g，由中国医学科学院实验动物中心提供。1.4试剂SOD测试盒和MDA测试盒均由南京建成生物工程研究所提供。葡萄糖(精制)、浓硫酸、苯酚(重蒸)均为分析纯。2方法与结果2.1样品的前处理菟丝子药材用无水乙醇回流2次，残渣风干，保存备用。2.2菟丝子多糖的提取流程菟丝子(超声水提取2次)→提取液(过滤)→滤液(浓缩)→浓缩液(醇沉)→沉淀复溶(除蛋白)→水溶液(醇沉)→菟丝子多糖粗品(洗涤，干燥)→菟

7、丝子多糖2.3多糖含量测定2.3.1标准曲线的制作按文献制作标准曲线，精密称取葡萄糖(105℃干燥4h)40mg定容至100ml，配成浓度为0.4mg/ml的葡萄糖溶液，取上述溶液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6，1.8ml分别于10支试管中，加入蒸馏水至2ml，加入1ml5%苯酚溶液，摇匀后迅速加入5ml浓硫酸，摇匀后静置10min，置沸水浴中加热15min，冷至室温，加水补至10ml,于490nm处测定A490，以0.0号管作空白，以A490作纵坐标，对应的糖含量作横坐标作标准曲线。标准曲线的回归方

8、程为：A＝8.4114C＋0.0007，r＝0.9996。2.3.2超声提取菟丝子多糖条件的优化在单因素考察的基础上，确定料液比，提取温度，提取时间作为考察因素，每个因素拟订3个