分类号s667.2学校代码10564

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1、分类号S667.2学校代码10564UDC学号2004216006密级学位论文番木瓜离体快繁体系的建立李晓艳指导教师姓名李建国研究员申请学位级别硕士专业名称果树学论文提交日期2007年5月论文答辩日期2007年6月2日学院名称园艺学院学位授予日期2007年6月答辩委员会主席林顺权教授                评阅人易干军研究员黄旭明教授摘要IV本研究以番木瓜(CaricapapayaL.)为试材,比较系统地摸索了影响离体再生的多种因素,建立了番木瓜组织培养高效离体快繁体系,并在此基础上,对目前番木瓜快繁中存在的主要问题(根系质量差)进行了初步探讨,以番木瓜组培生根苗正常根系与膨化根系为

2、材料,开展了番木瓜细胞组织学、形态学的观察与分析,取得的主要结果如下:(1)无菌培养体系的建立阶段,采用番木瓜顶芽与侧芽为外植体诱导丛芽,外植体采用的消毒方法为:自来水冲洗10min→饱和肥皂水浸泡20min→无菌水冲洗3次→75%酒精30s→无菌水冲洗3次→4%NaClO8min→无菌水冲洗4次→接种至含有0.2%“山农一号”I型溶液的培养基中。诱导培养基为:MS+BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+30g/L蔗糖+6.2g/L琼脂。(2)不定芽增殖阶段,采用3/2MS+NAA0.1mg/L+BA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.2g/L的配方为培养基,增殖系数5.08,植株高

3、度理想,生长健壮。(3)不定芽诱导生根阶段,采用两步生根法。第一步根系诱导阶段采用正交设计优化出的配方MS+IBA2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.2g/L为基本培养基,第二步根系生长阶段采用MS0空白培养基并附加0.05%~0.08%的活性炭。台农一号可达到80%以上的平均生根率,且生根根系质量得到改善,细长,无愈伤。(4)移栽阶段使用基质为泥炭土:珍珠岩=9:1的混合基质,代森锰锌灭菌,优化环境控制,可获得78%~100%移栽成活率和健壮的植株苗。(5)使用石蜡包埋法制作生根苗正常根系与膨化根系幼嫩根段切片,观察发现膨化根系的膨化部位发生在皮层部分。膨化根系皮层厚度异常增加,细胞体

4、积增大,形状不规则,排列无序;膨化严重的材料,其皮层细胞解体。(6)使用EPSONEXPRESSION10000XL1.0扫描生根苗正常根系与膨化根系,WinRHIZOPro2005b对结果进行分析发现,正常根系与膨化根系在根系体积、根系平均直径等指标上存在显著差异,正常根系根径级别主要分布在1~4级(0~1.000mm),而膨化根系根径级别主要分布在6~10级(1.500~2.500mm)。关键词:番木瓜离体快繁根系形态根系结构EstablishmentofinvitroPropagationofCaricapapayaL.LiXiaoyanIV(CollegeofHorticulture

5、,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China)Abstract:Papaya(CaricaPapayaL.)isanimportantfruittreeinmanytropicalandsubtropicalcountries.Apicalandlateralbudsofadultpapayatakenfromthefieldwereusedasmaterialsinthisstudy,andasystematicresearchwasconductedonthefactorswhichaffectingtheplantreg

6、eneration.Onthebaseoftheestablishmentofanefficientinvitropropagationsystemofpapaya,cytohistologicalandmorphologicaldifferencesbetweenthestumpyandnormalrootswerestudied.Themainresultsareasfollows:(1)Apicalandaxillarybudexplantsfrommaturedplantswereinducedtogrowasestablishedclonalonafull-strengthMura

7、shigeandSkoog(MS)mediumcontainingacombinationof0.5mg/LBAand0.2mg/LNAAplus30g/LSugarand6.2g/Lagar.Theeffectivesterilizationmethodwas:runningundertapwaterfor10min→dippinginsoapwaterfor20min→washingwithsterili

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