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《琼玉膏抑制肝癌细胞hbxag表达及对原发性肝癌的防治作用论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、琼玉膏抑制肝癌细胞HBxAg表达及对原发性肝癌的防治作用论文.freelaviainhibitionoftheexpressionofHBxAginhepaticcarcinomacellsAbstractAIM:ToinvestigatetheeffectsofqiongyugaoontheexpressionofhepatitisBxantigen(HBxAg)inBALB/umiceintoanhepaticcarcinomacellsechanisminprophylaxisandtreatmentofhepatocellularc
2、arcinoma.METHODS:Anudemousemodelanhepaticcarcinomacellsorice.TheexpressionofHBxAgintumorandlivertissuemunohistochemicalstudies.RESULTS:paredodelcontrolgroup,prophylaxisandtreatmentoreefficacyidetreatmentgroup.CONCLUSION:QiongyugaocansloorandinhibittheexpressionofHBxAg,aybe
3、anessentialmechanisminprophylaxisandtreatmentofhepatocellularcarcinoma.Keya;qiongyugao;HBxAg摘要目的:观察琼玉膏对人肝癌细胞移植裸鼠HBxAg表达的影响,分析其通过影响HBxAg表达防治原发性肝癌的机制。方法:建立人肝癌细胞移植裸鼠模型,观察琼玉膏预防及治疗对小鼠体质量、癌组织质量的影响,同时采用免疫组化法测定癌组织及肝脏中HBxAg的表达。结果:与模型组相比,.freele,ORF）之一X区,编码X蛋白,即HBxAg。HBxAg是一反式激活因子,在
4、肝癌组织中高度表达,可与TATA结合蛋白(TATAbindingprotein,TBP)作用,激活病毒和细胞的启动子,通过抑制DNA的修复,干扰Fas/CD95系统和抑制Caspase3活性推进HBV感染所致肝癌的发生和发展4。琼玉膏（qiongyugao,QYG）是集治疗与保健于一体的古代良方,我们的前期研究发现琼玉膏的主要成分有很好的抗乙肝病毒和肝纤维化的作用,并对抑癌基因P21、P53等的表达有一定促进作用,但是其是否对乙肝后肝癌及肝癌癌前病变有治疗或预防作用却尚未明确。因此,我们建立了人肝癌细胞裸鼠移植模型,并监测琼玉膏预防及治疗后
5、裸鼠体质量、癌肿质量、HBx的表达及肝癌病理改变。1材料和方法1.1材料兔抗人HBxAg多克隆抗体血清由ThomasJeffersonUniversity的FeitelsonMark教授赠送;ABCkit购自Vector公司;正常山羊血清,生物素标记的羊抗兔抗体,过氧化物酶标记的链酶卵白素、多聚赖氨酸和二氨基联苯胺显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。环磷酰胺（cyclophosphamide,cytoxan,CTX）针剂由江苏恒瑞医药股份有限公司提供,批号03121921。琼玉膏由本实验室自行配制,方法如下:取生地黄500g、茯苓1
6、00g,水提3次,每次2h,合并滤液;人参50g先切成薄片,水浸24h,继用文火水提2次,每次2h,合并滤液,倾入上述滤液,静置;取上清液,水浴浓缩为相对密度121～125的原液1000mL备用;蜂蜜350mL炼至中蜜;取原液1000mL加入炼蜜350mL,继续浓缩至1000mL,收膏过滤,测比重为140kg/L(80℃测),即成琼玉膏。SPFBALB/u小鼠,40只,雄性,4周龄,体质量19～22g,由中山大学肿瘤研究所提供。所有裸鼠均在无菌条件下按中国卫生部指导方针由广州中医药大学实验动物中心SPF实验室饲养。液氮冻存人肝癌HepG22
7、15细胞株购自解放军第458医院全军传染病中心肝病研究所。1.2方法1.2.1瘤液制备人肝癌细胞株经复苏、传代培养后,收集生长良好的细胞,用9g/L生理盐水悬浮,调整细胞密度为1×1010/L,制成人肝癌细胞悬液。以5g/L台盼蓝染液测定培养细胞活力（活细胞圆形透明,死细胞蓝色）。1.2.2模型建立02mL人肝癌细胞悬液（密度1×1010/L）于裸鼠背部皮下注射,建立肝癌模型5。肿瘤直径达到05cm时默认造模成功。1.2.3试验分组将40只BALB/u小鼠随机均分为5组（每组8只）:第1组为QYG预防组,接种癌细胞前用琼玉膏灌胃预防治疗2周
8、,1次/d,剂量14g/(kgd);第2组为QYG治疗组,接种癌细胞后用琼玉膏灌胃治疗8周,1次/d,剂量14g/(kgd);第3组为CTX治疗组,接种癌细胞后腹腔注射环磷酰胺治
