正交实验优选补阳还五合剂的提取工艺

《正交实验优选补阳还五合剂的提取工艺》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、正交实验优选补阳还五合剂的提取工艺【摘要】　　目的建立补阳还五合剂的提取工艺。方法采用正交实验的方法，以黄芪甲苷苯甲酰化后产物含量、水提得率和正丁醇萃取部位得率为指标，综合考察每次加水量、总煎煮时间、煎煮次数对提取效果的影响。结果加水8倍/次，共煮2h，2次提取为最佳提取工艺，验证实验证明了其优于正交各方法。结论该优选出的提取工艺合理。【关键词】补阳还五合剂正交实验黄芪甲苷　　Abstract：ObjectiveToestablishanoptimalextractionprocessforthemixtureofBuyangHuanedtooptimizet

2、heextractionprocess.ResultsThebestextractionprocesse;B：decoctingtimeC：decoctingfrequency),anditisthebestmethodbyvalidating.ConclusionThemethodisreasonable.　　Keyixture;Orthogonaldesign;AstragalusRP　　补阳还五合剂由黄芪、当归等中药组成，是经典名方制剂，具有补气、活血、通络的功能。本工艺采用L9（34）正交表安排实验，以黄芪甲苷衍生化产物的含量、水提取得率和正丁醇萃取部

3、位得率为指标，综合考察了每次加水量、总煎煮时间、提取次数3个因素对提取效果的影响，优选出该合剂的提取工艺。　　1仪器与试剂　　高效液相色谱仪，agilent1100，四元泵（G1311A），柱温箱（G1316A），Vsstation），agilent手动进样器（10μl定量环）。101-1型电热鼓风干燥箱(南通扈通制药器械设备厂)；标准品，黄芪甲苷（AstragalusRP0781-9706）中国药品生物制品检定所提供。所用药材均购于江苏省药材公司，并由江苏省中医院制剂实验室专家鉴定。吡啶、正丁醇、氢氧化钠、四氢呋喃、苯甲酰氯、三乙胺均购于南京化学试剂一厂，均

4、为分析纯，甲醇为色谱纯。　　标准品贮备液：精密称取黄芪甲苷标准品7.04mg，加吡啶溶解定容于10ml容量瓶中，标准品溶液浓度为0.704mg/ml，备用。　　2方法与结果　　2.1相关条件　　2.1.1色谱条件固定相：supelcoODSC18(4.6mm×25cm，5μl)色谱柱；流动相：甲醇-水-四氢呋喃（90∶6∶4，V/V/V，0.2%三乙胺）；柱温25℃，流速1.2ml/min，检测波长230nm。灵敏度0.1AUFS。　　2.1.2衍生化反应条件　　称取黄芪甲苷适量，置容量瓶中，吡啶溶解定容后精密吸取1ml置容量瓶中，加入2ml氯仿，吡啶-氯仿（

5、1∶2，V/V），在冰水浴的条件下加入苯甲酰氯0.4ml。摇匀后置4℃冰箱中保存24h，使反应完全。取出置蒸发皿中，在一定条件下挥干有机溶剂，置空气中一段时间后能凝结，甲醇溶解定容于容量瓶中。　　2.2正交实验正交实验的设计方案　　选用正交实验表L9（34），因素设计见表1。3因素分别为：加水倍数、总提取时间、提取次数。3因素3水平共做9组实验。表1因素水平（略）　　2.3水提取得率精密吸取各样品溶液适量，相当于1g药材量，水浴浓缩至浸膏。取出，置105℃烘箱中5h，取出，放冷称量，半小时后再置烘箱中1h，取出，放冷，称量。　　2.4正丁醇萃取部位得率　　取相

6、当与1g药材的各样品水提液与分液漏斗中加10ml水饱和的正丁醇萃取，共4次，正丁醇层合并。正丁醇层水浴蒸干，然后置105℃烘箱5h后取出，放冷，称量，30min后再置烘箱中1h，取出，放冷，称量。　　2.5标准曲线制备　　精密吸取对照品贮备液1ml于10ml容量瓶中，处理参照“衍生化反应条件”项下进行衍生化。衍生化产物用甲醇洗涤并转移、定容于10ml容量瓶中，再依次精密吸取5ml定容于10ml容量瓶，对照品衍生化产物溶液浓度为：0.0704，0.0352，0.0176，0.0088，0.0044，0.0022，0.0011mg/ml，上述色谱条件进行HPLC测

7、定。以黄芪甲苷衍生物峰面积对黄芪甲苷浓度（mg/ml）直线回归，结果表明，黄芪甲苷在0.0011～0.0704mg/ml范围内线性关系良好，回归方程为Y=75117X，r=0.99995。　　2.6样品处理同取各样品20ml于分液漏斗中，加水饱和的正丁醇萃取，萃取3次，20ml/次，正丁醇层合并加1%NaOH洗涤，洗涤3次12ml/次，再加正丁醇饱和水洗涤，洗涤2次，6ml/次。正丁醇层水浴蒸干，吡啶溶解定容于5ml容量瓶中，精密吸取1ml置容量瓶中，加入2ml氯仿，在冰浴的条件下加入苯甲酰氯0.4ml。摇匀后置4℃冰箱中保存24h消失，使反应完全。取出置蒸发

8、皿中挥干有机溶剂，甲醇定容于容量瓶中，