浅谈monascus ruber 5031洛伐他汀合成酶基因的pcr分析

《浅谈monascus ruber 5031洛伐他汀合成酶基因的pcr分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、浅谈Monascusruber5031洛伐他汀合成酶基因的PCR分析论文对绝大多数的朋友们来说是必不可少的，为了让朋友们都能顺利的编写出所需的论文，小编专门编辑了“浅谈Monascusruber5031洛伐他汀合成酶基因的PCR分析”，希望可以助朋友们一臂之力!Abstract:ObjectiveAnalysesthestructureofMonascusruber5031lovastatinbiosynthesisgenecluster.MethodsThreepairsofdegeneratePCRprimersatchi

2、ngtheregionsoflovastatinbiosynthesisgeneclusterinAspergillusterreus,oneofthemis,5’primer:TTCGATGCGGCCTTCTTCAAT,3’primer:ATGGTTCGGCATCGTAATTCC.ResultsA745bpDNAsequenceplifiedbyPCRfromMonascusruber5031genomicDNAandthesequenceisthesameilarsequenceonacolinK)即洛伐他汀(lovast

3、atin)，是胆固醇生物合成中的关键酶HMGCoA还原酶的竞争性抑制剂，是目前治疗高血脂症最有效的药物之一，并且对心绞痛患者和心肌梗死患者也有一定的治疗效果[1]。此外，它还可下调炎症相关转录因子的表达,从而有益于治疗动脉粥样硬化症[2]。近期研究表明,它可促进恶性甲状腺细胞凋亡[3]，具有抑制乳腺癌细胞增殖的功能[4]。　　对参与洛伐他汀生物合成的聚酮合成酶的研究主要在土曲霉中进行[5-7]，土曲霉也是目前工业化生产洛伐他汀的主要菌种。Reeves和Vederas等研究了土曲霉(Aspergillusterreus)洛伐他汀

4、的PKS基因结构，序列分析发现在克隆的64kbDNA中有18个开放读框(ORF)，经序列对比分析确定了13个ORF的功能。其基因簇可分为洛伐他汀结构中九酮部分的合成酶基因(即LNKS)和二酮部分的合成酶基因(即LDKS)，LNKS也称为lovB，而LDKS含有的功能域有：lovC(烯酯酰还原酶)、lovD(转脂酶)、ORF8(HMGCoA还原酶)、lovE(调节蛋白)、lovF(聚酮合成酶)、ORF13(调节蛋白)及细胞色素P450加单氧酶等。　　红曲霉中与合成洛伐他汀相关基因的结构的研究则较少，Chen等[8]于2005年8

5、月发往Genebank的丛毛红曲霉的莫那可林K合成酶基因簇是第一个被发现的红曲霉合成洛伐他汀相关酶的基因簇。由于红曲霉中可产生洛伐他汀及多种有生理活性的物质，它又是传统的食品添加剂，所以通过分析研究红曲霉中洛伐他汀合成相关基因将有利于更好地开发利用红曲霉。本文分别以土曲霉的LNKS基因的KS区域(位于lovB基因区域内)、土曲LDKS基因簇中的lovC(烯酯酰还原酶功能域)及lovE(调控蛋白功能域)基因为靶标设计了3对PCR引物，以这3组引物对产洛伐他汀的红色红曲霉菌的基因组DNA进行了PCR分析。一路陪伴考生编写大小论文，

6、其中有开心也有失落。在此，小编又为朋友编辑了“浅谈浅谈药物化学实验教学的改革”，希望朋友们可以用得着!药物化学实验是药学专业一门重要的专业实验课，它将药学知识和化学知识有机结合起来，对学生知识结构的形成起着承上启下的作用。药物化学实验教学既是理论联系实际的重要环节，又是培养学生创新意识、创新能力的重要途径。　　以往开设的合成实验对培养学生实验操作能力，加深对理论知识理解发挥了重要作用，但大多属于“验证性实验”，对发挥学生的主观能动性、培养创新能力有很大不足。因此，进行实验教学的改革，探讨如何更有效地培养全面复合实用型人才，已经

7、成为当前迫切需要研究的课题，是药学院校教学改革的重要组成部分。根据以往的实验教学工作经验,我们认为可以从以下几方面深化药物化学实验教学。　　一、巩固抓好基础实验　　药物化学实验与有机化学实验有相似之处，有机化学实验的一些方法与仪器经常应用于药物化学合成实验，两门学科很多内容也相似。因此，有机化学和药物化学实验教学应相互结合。但是，长期以来由于对各课程的实验内容缺乏统一安排，有时在药物化学实验中最需要用到的某些基础知识，有机化学实验并没有特别强调，各自的实验设计过分强调自身学科知识的系统性，同时受实验条件的限制而使内容比较局限，

8、因而不利于提高学生的综合能力。　　因此，根据药学人才的培养目标，结合两门课程的内在联系，药物化学和有机化学的实验内容应该统筹安排。这样，就有利于使学生在进行药物化学实验之前有针对性地具备一定的有机化学实验操作技能，并在药物化学实验课中对一些基本的操作技能进一步强化，使学生掌握