姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌pc3细胞凋亡影响论文

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1、姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞凋亡影响论文齐瑞芳于小玲尚芳芳赵辉【摘要】目的观察姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法分别用0、10、20、30和40μmol/L姜黄素作用PC3细胞48h后，CellCountingKit8(CCK8)法检测细胞存活率；选用0、5、10、20μmol/L姜黄素作用PC3细胞48h后，Hoechst染色观察PC3细胞形态的变化，AnnexinV/PI检测细胞凋亡率。结果姜黄素能显著抑制PC3细胞的增殖(F=36.82，q=4.88～15.36,P0.01);除0与5μmol/L姜黄素组细

2、胞凋亡率比较差异无显著性外，不同浓度姜黄素组之间细胞凋亡率比较差异有显著性(F=7.88,q=4.15～6.54,P0.05)。20μmol/L姜黄素作用PC3细胞48h后，倒置显微镜下可观察到部分凋亡细胞出现染色质凝集、核固缩、核碎裂等形态学改变。结论姜黄素能显著抑制体外PC3细胞的增殖，诱导细胞凋亡.freelinonproliferationandapoptosisofPC3cellsinnonandrogendependentprostatecancer.MethodsDifferentconcentrationsofcurcumin0,10,20,3

3、0and40μmol/LinedusingCellCountingKit8(CCK8);0,5,10,and20μmol/LcurcuminorphologyincouldsignificantlyinhibitthePC3cellproliferation(F=36.82,q=4.88-15.36,P0.01).Thedifferencesofthecellapoptosisratesindifferentconcentrationgroupsol/Lgroups(F=7.88,q=4.15－6.54,P0.01).Afteractingol/Lcurcumin

4、for48h,themorphologicalchangessuchaschromaticagglutination,karyopyknosis,andnuclearfragmentationcouldbeseeninpartofapoptoticcellsicroscope.ConclusionCurcumincould,invitro,dramaticallyinhibitPC3cellproliferationandinduceapoptosis,entalevidencefortherapyofnonhormonedependentprostaticcanc

5、er.［KEYI1640培养基、胎牛血清购自Gibco公司；胰蛋白酶、姜黄素和DMSO为美国Sigma公司产品；CellCountingKit8(CCK8)试剂盒、Hoechst染色试剂盒购自碧云天生物科技有限公司。姜黄素用DMSO稀释成5×10μmol/L，过滤除菌后，置于-20℃保存，临用前解冻。1.2实验方法1.2.1细胞培养人前列腺癌细胞PC3于含体积分数0.10的胎牛血清、100kU/L青霉素、链霉素的RPMI1640培养液中，在37℃含体积分数0.05的CO2培养箱中培养，每2～3d传代1次。1.2.2CCK8法检测细胞生长抑制率将处于对数生长期的PC

6、3细胞用2.5g/L的胰蛋白酶消化，使其成为单细胞悬液。血细胞计数板上计数，调整细胞密度为5×108/L，分别以每孔100μL接种于96孔板，继续培养24h。细胞贴壁后分别加入姜黄素溶液使终浓度分别为10、20、30、40μmol/L，以不加药物为对照组，RPMI1640为阴性对照组，每组设6个复孔。于24h后，每孔加10μL的CCK8，设置空白对照孔，CO2孵箱中继续孵育0.5～4.0h，测450nm处吸光度(A)计算细胞存活率。肿瘤细胞存活率=(用药组A值/对照组A值)×100%。1.2.3Hoechst染色观察细胞形态学变化细胞经消化计数后接种于盛有盖玻片的6孔板，

7、密度为5×107／L，过夜，使盖玻片长满的细胞约为50%～80%。用终浓度为0、5、10、20μmol/L姜黄素刺激细胞48h后，吸尽培养液，加入0.5mL固定液固定10min。去固定液，用PBS洗2次（用摇床轻轻晃动），每次3min，吸尽液体。加入Hoechst33258染色液0.5mL，染色5min，轻轻晃动。用PBS洗2次，每次3min。滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免出现气泡。荧光显微镜下观察蓝色细胞核的形态。1.2.4AnnexinV/PI检测细胞凋亡率选用5、10、20μmol/L浓