桂郁金水提物对小鼠出血与凝血时间的影响论文

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1、桂郁金水提物对小鼠出血与凝血时间的影响论文杨秀芬，周芳，李丽花，马燕【摘要】目的观察桂郁金水提物对小鼠出血与凝血时间的影响。方法小鼠灌胃给药(8，16，32g·kg-1)1次，或1次/d，连续5d.freelakoxide(Ⅳ)、isozedoarondiol(Ⅴ)、curcumenol(Ⅵ)和β2谷甾醇(Ⅶ)［3］。桂郁金为广西产大宗中药材，近几年产量约占全国郁金总产量的60%以上，对我国市场有较大的影响力。但其活性的物质基础和作用机制研究报道却很少。其止血与凝血作用也未见报道。我们对桂郁金水提物的止血与凝血活性进行了初步的探究。现报道如下。1材料和方法1.1

2、动物、药品和试剂昆明种小鼠,雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供（合格证号：SCKX桂2003-0001）。云南白药（云南白药集团股份有限公司，批号20061020）。1.2桂郁金的提取方法［3］将桂郁金原药材（2008-08采自广西钦州市灵山县陆屋镇，经南宁市药品检验所鉴定）捣成碎块，称取2.0kg，水浸泡2h后，煎煮两次，1h/次，滤过，合并滤液，用95%的乙醇沉淀，静置24h后滤过，合并滤液，旋转蒸发仪减压浓缩得桂郁金水提物，冰箱放置，备用。1.3急性毒性实验根据改良寇氏法,首先将配置好的药液稀释成不同浓度,进行预试验，测定小鼠死亡率在0%～100%的

3、剂量范围。根据预试验的结果,将50只小鼠随机分成5组，按体质量1次给药，以不同浓度的药液剂量按0.2ml·10g-1灌服,.freell/10g腹腔注射0.7%硫喷妥钠，待小鼠完全进入麻醉状态后，用解剖剪距小鼠尾尖3mm处横剪断，待血液自行溢出计时，每30秒用滤纸吸血1次，直至血液自然停止所需的时间即为该鼠的出血时间。另将小鼠随机分成5组，分别灌胃给以高（32g·kg-1）、中(16g·kg-1)、低(8g·kg-1)的桂郁金水提物、云南白药（10g·kg-1）和生理盐水，连续灌胃5d，1次/d，末次给药1h后，按上述方法测定小鼠的出血时间。1.5凝血时间的测定

4、（毛细玻管法）［5，6］将小鼠随机分成5组，分别灌胃高、中、低桂郁金水提物、云南白药和生理盐水，连续灌胃5d。末次给药1h后用内径1mm，长10cm的玻璃毛细管插入小鼠左眼内球后静脉丛取血，血液注满后取出，平放于桌面每隔30秒折断毛细玻管约0.5cm，并缓慢左右拉开，观察折断处是否有凝血丝，自血液流入毛细管内开始计时，至血凝丝出现为止，所历时间为毛细管该端凝血时间。另将小鼠随机分成5组，分别一次灌胃给以高、中、低桂郁金水提物、云南白药和生理盐水，1h后按照以上方法测定凝血时间。1.6凝血时间的测定（玻片法）［5，6］将小鼠随机分成5组，分别灌胃高、中、低桂郁金水

5、提物、云南白药和生理盐水，连续灌胃5d，末次给药1h后用毛细管于小鼠左眼内球后静脉丛取血，滴两滴在玻片上并同时计时，每30秒用清洁针头在玻片上挑血丝一次，当有血丝出现时计时完毕，即得凝血时间。另将小鼠随机分成5组，分别一次灌胃给以高、中、低桂郁金水提物、云南白药和生理盐水，1h后按照以上方法测定凝血时间。1.7统计处理数据以±s表示，用MicrosoftExcel进行数据处理，统计分析采用t检验。2结果2.1急性毒性试验经预试验测得该药的毒性剂量范围约为100～320g·kg-1，相邻两组剂量之间的比例为r=1∶0.8较为合适。根据预试结果，设计正式实验各组的剂

6、量，分别为：104.9g，131.1g，163.8g，204.8g，256.0g/kg，以0.2ml·10g-1的剂量一次性灌胃给予10只小鼠。结果见表1。表1桂郁金水提物对各组小鼠用药、死亡情况（略）中毒死亡的小鼠死亡前均有惊厥现象，死后解剖观察发现，胃肠发黑，其他脏器未见明显异常。其他小鼠没有明显异常表现。采用改良寇氏求得LD50=170.9原生药g·kg-1，LD50的95%的可信限为155.2～188.3g·kg-1。2.2桂郁金水提物对小鼠出血时间的影响从表2中可以看出一次性灌胃给予桂郁金水提物，剂量为32，16g·kg-1时，出血时间明显缩短，与空白

7、组比较P＜0.01，剂量为8g·kg-1时，与空白组比较出血时间无明显差异。当连续给小鼠灌胃桂郁金水提物5d，剂量为32，16g·kg-1时，与空白组比较，出血时间无明显差异。桂郁金水提物剂量为8g·kg-1时，与空白组比较P＜0.05，出血时间明显缩短。表2桂郁金水提物对小鼠出血时间的影响（略）2.3桂郁金水提物对小鼠凝血时间的影响从表3中可以看出给小鼠灌胃1次，用玻片法观察到剂量为32g·kg-1、16g·kg-1时，与空白组比较凝血时间无明显差异；剂量为8g·kg-1时，与空白组比较P＜0.05，凝血时间明显缩短。用毛细管法观察，与空白组比较各剂量组凝血时

8、间无显著性差异。从表4可