旱莲草对衰老小鼠自由基代谢的影响论文

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1、旱莲草对衰老小鼠自由基代谢的影响论文【关键词】旱莲草【摘要】目的:探讨旱莲草对衰老小鼠体内氧自由基代谢的影响.方法:以D半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型,测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性及丙二醛(MAD)含量,脑细胞膜Na+K+ATP酶、Ca2+APT酶活性.结果:与模型组比较,旱莲草组可明显提高脑组织SOD(P0.01)和GSHPX(P0.05)的活性;提高脑细胞Na+K+ATP酶(P0.01)、Ca2+APT酶(P0.05)活性,降低MDA含量(P0.01).结论:旱莲草具有

2、明显的抗衰老作用,其作用机制可能与其清除自由基的作用有关.【关键词】旱莲草;自由基;衰老0引言旱莲草为菊科一年生草本植物鳢肠Ecliptaprostratal的全草,江南诸省均有分布,为常用中药之一.祖国医学认为旱莲草入肝、肾经,具有滋阴补肾、凉血止血之功效.主治牙齿松动,须发早白.freelL煎煮30min,四层纱布过滤,药渣用2000mL自来水煎煮30min过滤,合并滤液,浓缩至1kg/L,高压灭菌,4℃冰箱保存备用.1.2.2动物分组及给药将50只小鼠随机分成5组,每组10只,即空白对照组,模型组,旱莲草低、中

3、、高剂量组.实验组分别以8g/(kgd),16g/(kgd),24g/(kgd)旱莲草煎液灌胃给药,1次/d.对照组、模型组每日灌胃等量生理盐水.1.2.3造模方法模型组和旱莲草低、中、高剂量组每日颈背部皮下注射10g/LD半乳糖0.14g/(kgd),空白对照组注射等量生理盐水.1.2.4小鼠脑组织匀浆制备给D半乳糖及受试药42d后,断头处死小鼠,迅速取出小鼠脑,用冰冷的生理盐水洗2次,滤纸拭干称质量,剪碎组织块后,倒入匀浆瓶中,量取9倍生理盐水,先取少量倒入装有组织块的匀浆瓶中,冰水中匀浆15min,然后将余下的

4、生理盐水加入,制成100g/L的脑组织匀浆.1.2.5脑组织SOD酶、GSHPX酶活力及MDA含量测定①脑组织SOD酶活力的测定:取上述脑组织匀浆4000r/min离心15min,取上清液5μL,按试剂盒说明书方法,测定A值;②脑组织GSHPX酶活力的测定:取脑组织匀浆上清液,按试剂盒说明书方法,测定A值;③脑组织MDA含量测定:以硫化巴比妥比色法取匀浆上清液,制备标准管、空白管、测定管,分别在532nm处1cm光径比色杯,蒸馏水调零,测A值.1.2.6脑组织细胞膜Na+K+ATP酶、Ca2+ATP酶活性测定取脑组织

5、匀浆以10625g离心20min,按试剂盒说明书提取细胞膜测Na+K+ATP酶活性.统计学处理:实验数据用x±s表示,采用方差分析处理数据.2结果2.1旱莲草对D半乳糖亚急性衰老小鼠脑SOD,GSHPX,MDA含量的影响给予D半乳糖后,与对照组比较,小鼠脑中的MDA含量明显增加(P0.01),.freelDA含量,提高SOD,GSHPX的活性(表1).表1旱莲草对D半乳糖衰老模型小鼠脑组织中SOD,GSHPX,MDA含量影响(略)aP0.05,bP0.01vs对照;cP0.05,dP0.01vs模型.2.2旱莲草对D

6、半乳糖亚急性衰老小鼠脑细胞Na+K+ATP酶及Ca2+ATP酶活性的影响给予D半乳糖后,与对照组比较,小鼠脑细胞Na+K+ATP酶及Ca2+ATP酶活性明显降低(P0.01),同时给予旱莲草制剂组能明显提高脑细胞Na+K+ATP酶及Ca2+ATP酶的活性(表2).表2旱莲草对D半乳糖亚急性衰老小鼠脑细胞Na+K+ATP酶及Ca2+ATP酶活性的影响(略)aP0.05,bP0.01vs模型;dP0.01vs对照.3讨论机体衰老的分子机制包括诸多因素,而自由基的损伤在衰老机制的研究中占有重要的地位.机体在代谢过程中可产生

7、羚自由基(HO-),琉自由基(RS-),氢过氧物自由基(HO2)等活性氧,这些自由基组织内一旦生成,则可损伤邻近的生物膜或其它组织生物大分子包括糖类、蛋白质、DNA和脂质,使组织遭受损伤.尤其是使DNA碱基发生羟化等修饰及多核昔酸链断裂,使DNA的复制与转录受到严重干扰,加速机体的衰老过程[1-2].细胞内Ca2+的超载也与衰老密切相关[3].D半乳糖所致的亚急性痴呆模型,已为大多学者所公认,长期注射D半乳糖使其在细胞内大量集聚,造成代谢紊乱,导致过多自由基的产生.体内存在的氧化防御系统包括超氧化物歧化酶(SOD),

8、谷胱甘肤过氧化物酶(GSHPX)和过氧化氢酶(CAT)等,对抗氧化应激反应,清除机体内产生的自由基.本结果证实旱莲草可以减少衰老小鼠脑组织中MDA的产生,增加SOD,GSHPX的活性.旱莲草通过减少脑中氧自由基的产生,增强清除氧自由基的能力,提高机体抗氧化的功能,抑制机体、组织、细胞的过氧化过程.并能明显提高脑细胞Na+K+ATP酶及Ca2+A

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