胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异的论文

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1、胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异的论文【摘要】目的：类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,ra）是一个多基因多因素参与的病理过程。实验中通过建立与ra发病机制相似的胶原诱导性关节炎(collageninducedarthritis,cia)大鼠动物模型，运用蛋白质组技术对正常大鼠和cia大鼠模型不同时间点滑膜组织的蛋白质点进行比较分析，为鉴定cia大鼠滑膜病变相关蛋白质及研究ra发病机制奠定基础。方法：用牛ⅱ型胶原和完全福氏佐剂建立cia大鼠模型，采用一步抽提法抽提滑膜蛋白质，运用固相ph梯度双向凝胶电泳分离各组大鼠滑膜组织的总蛋白质，用pdq

2、uest软件分析图谱，比较差异蛋白质，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrixassistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry，malditofms）得到相应肽质指纹图谱，用mascot查询软件搜索数据库，鉴定部分差异蛋白质。结果：成功建立了cia大鼠模型，获得分辨率较高、重复性较好的大鼠滑膜组织双向电泳凝胶图谱。正常组与25、35和45天模型组大鼠滑膜组织凝胶图谱的平均蛋白质点数分别为1070±41、1049±22、1079±44和1088±39。在4个组均有表达差异的蛋白质点中随机

3、取20个点进行肽质指纹图分析，鉴定了部分与细胞代谢、信号转导及结构相关的差异表达蛋白质。结论：建立了分辨率较高且重复性较好的正常大鼠与cia大鼠不同时间点滑膜组织的双向凝胶电泳图谱，鉴定了一些与cia大鼠滑膜病变相关的差异表达蛋白质，为识别ra病变相关蛋白质及推断ra病变过程奠定基础。.【关键词】胶原诱导关节炎蛋白质组双向凝胶电泳malditofms　　tensionalgelelectrophoresisandparativeproteomeanalysisofcollageninducedarthritis(cia)ratsynovium　　xieedicineinst

4、itution,xiangyahospital,centralsouthuniversity,changsha410008,china　　　　［abstract］objective:toestablishcollageninducedarthritisratmodelsimilartorapathogenesis,pareandconductdifferentproteomicanalysisbetalratsandciaratssynovium,andthusidentifyproteinsrelatedtociaratpathologicalsynovium,asethod

5、s:collageninducedarthritisratmodelensionalelectrophoresisnormalandmodelratsynovium.havingbeenstained,proteinseselectedproteinspotsassfingerprint(pmf)basedonmatrixassistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry(malditofms)anddatabase.results:ciaratmodelratsynovialproteinsa

6、l,25,35and45dayratsynovialproteinslyfromnormalandmodelgroupsf,someofetabolism,signaltransductionandsoforth.conclusion:alandciaratsynoviumindifferentstageshavebeenestablished,andsomedifferentlyexpressedproteinsconcerningciaratsynovitishasbeenidentified.theresultsmayprovideabasisforfurtherrese

7、archofrapathogenesis.　　［keyalditofms　　类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,ra）是以慢性多关节滑膜炎、骨及软骨破坏为主要特征的全身自身免疫性疾病，全球发病率约为0.5%～3%，其病理基础主要是滑膜和关节等全身结缔组织的破坏和解聚。目前已从基因水平进行了大量的研究，基因的功能是通过mrna和蛋白质来体现的，但mrna水平的基因表达并不能完全代表蛋白质水平的状况，而且蛋白质还存在着翻译后修饰、转移定位、构象变化等特点，因此有