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时间:2018-07-07
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1、枸杞提取物的抗氧化作用论文杨薛康,海春旭,梁欣,赵海龙,柏桦【关键词】枸杞;化学发光测定法;抗氧化作用;脂质过氧化作用AntioxidationofLyciumbarbarumextracts【Abstract】AIM:Toinvestigatetheantioxidativeactivityoftheethanolandbarbarumandtheirdoseeffectrelationship.METHODS:TheLyciumbarbarumextractsicrosomesbycalciumprecipit
2、ation.Theoxidantscavengingpotentialoftheeasuredusingthefolloiluminescencesystems:CoCl2/EDTAinducedluminolchemiluminescencemethodandxanthinexanthineoxidaseluminolmethod.TicrosomesmodelsinetheantioxidationofLyciumbarbarumextracts.Thenthecontentofmalondialdehyde(
3、MDA)etryforanalyzingtheantioxidationofLyciumbarbarumextractsinthe2models.RESULTS:Inthe2chemiluminescencesystems,paredbarbarumandluminousintensity;theIC50ofodel,thecontentofMDAinthosegroupsbarbarumhaveeffectiveantioxidativeeffectsinadoseeffectrelationship.Butth
4、eethanolextracthasaparativelystrongereffect.【Keybarbarum;chemiluminescentmeasurements;antioxidation;lipidperoxidation【摘要】目的:探讨枸杞醇提物和水提物的抗氧化作用.方法:钙沉淀法提取雄性SD大鼠肝微粒体.采用OH和O2-两种化学发光体系观察枸杞醇提物和水提物对发光强度的抑制作用.freelenehydroperoxide,CHP),3K30型台式高速冷冻离心机均为美国Sigma公司产品;MDA标准
5、品为德国Merck公司产品;牛血清白蛋白为江苏华美试剂公司产品;过氧化氢,三羟甲基氨基甲烷(trisaminomethane,TRIS),三氯乙酸,乙酸,乙醇,蔗糖,抗坏血酸,硫酸亚铁,CCl4,KCl和CoCl2等均为国产分析纯;722型光栅分光光度计为山东高密分析仪器厂产品,IFFME型流动注射化学发光分析仪为西安瑞迈分析仪器有限责任公司产品.1.2方法1.2.1微粒体的制备[2]大鼠禁食24h,颈椎脱臼处死,迅速取出肝脏,用预冷的生理盐水洗去血污,按5mL/g肝湿质量的比例加入pH7.4的250mmol/L蔗
6、糖Tris/HCl缓冲液,用电动匀浆器制成匀浆.操作全过程在0~4℃下进行.采用钙沉淀法提取肝微粒体,-20℃保存.用前按1mL/g肝湿质量比例用预冷的0.15mol/LKCl悬浮.蛋白含量采用Lool/L的硼酸缓冲液,内含1g/L的乙二胺四乙酸,0.2g/L的CoCl26H2O,用1mol/LNaOH调pH为9;取配好的溶液1mL,加5.6×10-4mol/L的鲁米诺100μL,7.9mol/L过氧化氢25μL,不同浓度的样本25μL,充分混匀后,立即启动化学发光,记录60s内化学发光动力学曲线.重复3次测定平行
7、样本.1.2.3O2-化学发光体系的建立根据文献[5]的方法并略加改动进行实验.取0.6mL鲁米诺(1mmol/L)碳酸缓冲液(pH10.2),0.6mL黄嘌呤(150μmol/L)碳酸缓冲液(pH10.2),0.01mLXO(4×103U/L)磷酸缓冲液(pH7.8),25μL不同浓度的样本,混匀后,立即启动化学发光,记录60s内化学发光动力学曲线.重复3次测定平行样本.1.2.4微粒体VC/Fe2+脂质过氧化(lipidperoxidation,LPO)激发模型的建立采用文献[6]的方法.将枸杞醇提物和水提物分
8、别用乙醇和双蒸水溶解,分为20.00,10.00,5.00,2.50和1.25g/L5个剂量组.每组设3个平行样.同时设1个空白对照,1个阴性对照(蒸馏水和枸杞提取物)及3个阳性对照(用蒸馏水替代枸杞提取物).反应体系中含缓冲液0.8mL,50μmol/LFeSO40.15mL,5mmol/LVC0.15mL,微粒体悬液和不同浓度的枸杞提取物各0.2mL.比
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