左卡尼汀对脑缺血再灌注损伤的抗氧化作用及其机制研究

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1、左卡尼汀对脑缺血再灌注损伤的抗氧化作用及其机制研究【关键词】左卡尼汀;脑缺血再灌注;丙二醛;超氧化物歧化酶  AbstractObjective:Toinvestigatetheprotectiveeffectsoflevocarnitineoncerebralischemiareperfusion(I/R)injuryinratsandanalyzethemechanismofactionoflevocarnitineinpreventingandtreatingischemiccerebrovasculardisease.Methods:Forty

2、healthymalelyallocatedintofourgroups:shamoperationgroup,salinecontroledgroup,treatedg/kgoflevocarnitinegroupandtreatedg/kgoflevocarnitinegroup,eachoftenrats.ThemodelsofthefocalcerebralI/Rratsadebythemiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)exceptshamoperationgroup.Afterischemiafor2ha

3、ndreperfusionfor24h,malondialdehyde(MDA)levelsandsuperoxidedismutase(SOD)activityeasuredinthecerebraltissues.ThepathologicalfeatureofcerebraltissueonstratedthatlevocarnitinehasapotentneuroprotectiveeffectagainstcerebralI/Rinducedinjurytoenhancetheactivityoftheantioxidantsystemand

4、decreasetheincidenceoffreeradicalinducedlipidperoxidationinratbrain.  Keyiareperfusion;malondialdehyde;superoxidedismutase  本实验通过观察左卡尼汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平的影响,探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用及可能的作用机制,为临床应用左卡尼汀治疗脑梗死提供理论依据。  1资料与方法  1.1动物与试剂  选健康雄性DA试剂盒(南京建成生物研究所);普通试剂由山西医科大学实验中心提

5、供。  1.2方法  1.2.1实验分组及给药方法  40只CAO)再灌注模型制作  用改良Longa法[1]建立大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。将大鼠用10%水合氯醛3mL/kg腹腔麻醉,颈正中右旁开0.5~1cm切口,钝性分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉,结扎颈外动脉、颈总动脉近心端,在颈总动脉距离分岔口大约5cm处用眼科剪剪开一小口,将直径0.236mm的进口鱼线插入,以分岔口处开始测量距离,插入1.8~2cm后固定鱼线,缝合。缺血2h后将线栓拉出1cm左右即可,形成再灌注。其中假手术组插入1.0cm鱼线,其余步骤同实验组。神经功能缺陷评分按

6、照Longa等[1]的5级4分法标准。  1.2.3脑组织病理切片的制备及MDA和SOD含量的测定  各组大鼠缺血2h再灌注24h后行神经功能评分后颈椎脱臼处死,在冰盘上快速取脑,置0~4℃生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,各组随机取2只大鼠右侧脑组织迅速固定,石蜡包埋后,在海马部位做矢状切片,厚约5μm,HE染色,观察组织学变化。剩余右侧脑组织加入9倍量的0~4℃生理盐水,在冰水浴中用玻璃匀浆器制成10%的脑匀浆,3000r/min离心15min,取上清液检测MDA和SOD。严格按试剂盒说明书步骤要求操作,计算出MDA和SOD含量。  1.2.4统计

7、学方法  采用SPSS13.0软件包,数据以±s表示,采用单因素方差分析进行统计学处理。P<0.05为差异有统计学意义。  与A组比较,B组3种ATP酶的活性均明显降低,差异有统计学意义。C组、D组与B组比较差异有统计学意义。C组与D组比较SOD活力差异有统计学意义(见表1)。表1左卡尼汀对大鼠脑缺血再灌注后脑组织SOD、MDA含量的影响  3讨论  脑缺血再灌注后导致缺血区自由基增多,过多的自由基与脑组织生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化连锁反应[2],使脑组织生物膜受到损伤,从而引起细胞水肿、损伤直至死亡。MDA是脂质过氧化产物之一,其含量间接反

8、映了细胞受自由基攻击的脂质过氧化程度,是目前公认的判别脂质过氧化的参数指标。SO

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