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时间:2018-07-07
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1、脂质体流感疫苗制备及体液免疫应答的论文【摘要】目的:制备脂质体流感疫苗并对其体液免疫效果和保护效率进行研究。方法:采用薄膜法与冷冻干燥法相结合的方法制得多层脂质体;用制得的脂质体流感疫苗和普通疫苗分别免疫小鼠,用血凝抑制实验(hi)和酶联免疫吸附试验(elisa)对免后2~13周的小鼠血清的抗体水平进行检测,hi检测其特异性抗体,elisa检测igg抗体水平并对小鼠的保护效率进行检测。结果:实验中,脂质体流感疫苗在2μg/mouse组和4μg/mouse两个剂量组中,不同免疫时间内其hi值可分别较非脂质体疫苗组高出
2、2~3和4倍,产生抗体的水平经elisa实验得出较非脂质体疫苗组高出1倍左右,故可激发更高的体液免疫;保护效力为4/6。结论:脂质体流感疫苗能够刺激机体产生更高的体液免疫和更高的保护效力。【关键词】流感疫苗脂质体体液免疫血凝抑制试验 studyonpreparationofliposomeencapsulatedinfluenzasplitvaccineanditshumoralresponsesinmice haoshumei,eencapsulatedinfluenzasplitvaccineands
3、tudyitshumoralresponseandprotectiveimmunityinmice.methods:preparedmultilaminarliposomevaccinebyfilmevaporaqtionbinedmunizedbalb/cmiceeencapsulatedinfluenzasplitvaccineandtheroutineinfluenzasplitvaccine,serumantibodiesagglutinationinhibition(hi)testandelisa,t
4、hehitestforthespecialantihaantigenandtheelisatestfortheigg.protectiveimmunityagainstintranasalviruschallengeinedat12eencapsulatedinfluenzasplitvaccineelicitedahighertiterofhiandiggthanthenonliposomalvaccine,atintervaltimes,thehititerofliposomeencapsulatedin
5、fluenzasplitvaccinecouldreach23timesand4timesmorethanthenonliposomalvaccinein2μg/mousegroupand4μg/mousegroup,anditsantigenlevelexaminedbyelisaehigherthanthenonliposomalvaccine.ofthe6immunizedmice,4thechallengealencapsulatedinfluenzasplitvaccineinduceshigherh
6、umoralimmunityandshoe;humoralimmunization;hitest 目前对流感的防治最为有效的一种手段是接种流感疫苗,疫苗的各种佐剂(包括人工合成佐剂和天然佐剂)以及高效载药系统(包括脂质体、微囊等)的研究和使用使疫苗的效果得到很大提高[14]。.使用佐剂疫苗可在减少抗原使用量的情况下保持较高免疫效果。脂质体为一种新兴的药物剂型,其在作为药物或疫苗的佐剂或载体方面的效果越来越受到广大医药工作者的关注。本试验的研究目的在于设计一种脂质体包裹的流感疫苗,以达到如下的几点要求:①制备方法
7、简单,使用安全;②能够给机体更有效的保护;③用更少的剂量即能达到免疫效果。本研究表明,脂质体流感疫苗可激发机体产生更强的体液免疫和保护效率。 1材料与方法 1.1流感病毒和抗原a/california/7/2004(h3n2)毒株及抗原由长春生物制品研究所疫苗六室提供。 1.2实验动物6周龄洁净级雌性balb/c小鼠,体重18~20g,由长春生物制品研究所动物室提供。 1.3主要仪器zetasizer3000hs激光衍射粒度分析仪(英国马尔文公司);epicsxl流式细胞仪(coulter,美国)。 1
8、.4脂质体流感疫苗的制备采用薄膜法与冷冻干燥法相结合的方法制得多层脂质体,步骤如下:氢化大豆卵磷脂(pc)(德固赛公司,德国)和胆固醇(sigma,美)混合溶于氯仿,40℃真空旋转蒸发,成膜[5]。加水,剧烈震荡,水浴超声约1小时致淡云雾状,按比例与流感裂解疫苗混合,冻干。 1.5脂质体流感疫苗的性质研究 1.5.1脂质体的形态学观察分别用高倍显微镜(1
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