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1、STR-PCR半定量检测嵌合体方法在异基因造血干细胞移植中应用[摘要]目的:应用短串联重复序列-聚合酶链反应(STR-PCR)半定量方法检测异基因造血干细胞移植后供者细胞比例并探讨其临床意义。方法：给30例接受移植的患者行移植后嵌合体检测,采集外周血提取DNA,对9个STR位点行聚合酶链反应扩增,扩增完成后行聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色显影,再计算嵌合率。结果：30例患者均检测到供者细胞,24例达到完全嵌合(CC),6例形成混合造血(MC)。在移植后14d,稳定植入的患者多数表现为CC。CC组的aGVHD发生率高于MC组,7例患者在复发前检测到嵌合率(donorcell,DC)下降,经
2、相应免疫治疗后有3例达到CC。结论：监测异基因造血干细胞移植后嵌合率的动态变化过程,PCR-STR是一种简单经济的方法,可根据嵌合状态指导个体化免疫治疗,对患者的长期存活有重要意义。［关键词］短串联重复序列-聚合酶链反应；异基因造血干细胞移植；嵌合体分析［中图分类号］R733.7;R730.54［文献标识码］A［文章编号］1671-7256(2011)02-0138-04doi：10.3969/j.issn.1671-7256.2011．02.005Semi-quantitativeanalysisofchimerismafter9allogeneicstemcelltransplant
3、ationusingSTR-PCRLIUJing,DINGJia-hua(DepartmentofHematology,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity，Nanjing210009,China)［Abstract］Objective:Toinvestigatethevalueofsemi-quantitativeanalysisoftheratioofdonorcellsafterallogeneichematopoieticstemcelltransplantation(allo-HSCT)usingshorttandemrepeat-polyme
4、rasechainreaction(STR-PCR).Methods：Among30patientsreceivingallo-HSCTwereevaluated,DNAwasextractedfromperipheralbloodandnineSTRlociwereamplifiedfollowedbypolyacrylamidegels,silverstaining,andthentheengomphosisrateswerecalculated.Results:Donorcellscouldbedetectedfromallof30cases,24casesformedcomple
5、techimerism(CC)and6casesformedmixedchimerism(MC).MostpatientswithstableengraftmentsshowedCConday+14.TheincidenceofaGVHDingroupCCwassignificantlyhigherthanthatingroupMC.Beforethetimeofrelapse,STR-PCRindicatedadecreaseofdonor9cell(DC)in7patients,and3caseswereofcompletechimerismbycorrespondingimmuno
6、therapy.Conclusions：STR-PCRprovideasimpleandeconomicapproachformonitoringthedynamicprocessofdonorchimerism.Individualimmunotherapybasedonchimerismisimportantforpatientlongtimesurvial．［Keywords］shorttandemrepeat-polymerasechainreaction;allogeneichematopoieticstemcelltransplantation;analysisofchime
7、rism异基因造血干细胞移植现今已经成为临床上各种恶性及非恶性血液病治疗的一项重要措施,供者细胞植入受者体内后供者细胞及受者细胞含量情况是动态变化的,需要进行动态的检测。检测结果有助于判断移植是否成功,及预测移植物抗宿主病的发生与疾病的复发,并指导下一步免疫干预治疗的应用［1］。短串联重复序列(STR)是由2～6个碱基对组成的一种遗传标记,已在移植后嵌合体检测中广泛使用。传统的STR-PCR检测方法敏感性多大于5%,但当供受者性别相
