非清髓异基因外周血造血干细胞移植后嵌合体分析

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1、非清髓异基因外周血造血干细胞移植后嵌合体分析作者:陈宝安,熊辉霞,丁家华,苏恩本,赵刚,王骏,高冲,孙耘玉,程坚【摘要】本研究旨在探讨非清髓异基因外周血造血干细胞移植(NAPBSCT)后造血嵌合体的临床意义。采用FBC(氟达拉宾+白消安+环磷酰胺)±阿糖胞苷(Ara-C)预处理方案,对28例血液病患者进行NAPBSCT,采集供者和受者术前外周血及术后不同时间段的序列血样,用STR-PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色和凝胶成像分析技术半定量方法计算供体细胞嵌合率。结果显示:移植后1月,28例患者中1例移植失败,22例形成完全供者造血嵌合体(CC),5例形成混合造血嵌合体(M

2、C);移植后7天时供者细胞即占优势(74.71%),较中性粒细胞(ANC)和血小板(Plt)的平均恢复时间均明显提前;CC组的aGVHD发生率高于MC组(P<0.05),两组cGVHD发生率无显著差异(P>0.05);1例MC患者发生早期移植排斥;CC组和MC组复发率无显著差异(P>0.05),1例在CC状态下复发。3例MC患者经早期临床干预治疗获得CC和完全缓解。结论:造血嵌合体的动态定量检测对判断早期植入,预测移植物排斥、复发和GVHD,以及指导临床干预治疗具有重要意义。【关键词】非清髓造血干细胞移植  AnalysisofHematopoieticChimerisma

3、fterNon-myeloablativeAllogenEicPeripheralBloodStemCellTansplantation  AbstractTheaimofthisstudyatopoieticchimerismafternon-myeloablativeallogenEIcperipheralbloodstemcelltransplantation(NAPBSCT).28patientsreceivedNAPBSCTenincludedFBC(fludarabine,busulphan,cyclophosphamide)±Ara-C.Peripheralb

4、loodi-quantitativeassessmentofhematopoieticchimerismedbyshorttandemrepeat-polymerasechainreaction(STR-PCR),polyacrylamidegelelectrophoresis(PAGE)andsilverstaining,andanalyzedbyImageAnalysisSystem.Theresultsshoedpletechimerism(CC)and5casesixedchimerism.Onday7aftertransplantation,theaveragep

5、ercentageofdonorcellseofdominanceofthedonor-specificallelicpatternprecededtherecoverytimeofneutrophilsandplatelets.TheincidenceofaGVHDingroupCCissionafterearlyimplementationoftherapy.Itisconcludedthatsequentialandquantitativedetectionofchimerismmaybeofgreatvaluetoevaluateengraftmentandtopr

6、edictgraftrejection,diseaserelapseandGVHD.Furthermore,itmayprovideabasisforearlyinterventiontreatmentintherelatedplications.  Keyyeloablativestemcelltransplantation;non-myeloablativeallogeneicperipheralbloodstemcelltransplantation;CTR-PCR;hematopoieticchimerism  非清髓异基因造血干细胞移植(NASCT)时由于减量的放

7、、化疗预处理加上强效的免疫抑制,在移植后多形成供、受体细胞不同比例的混合嵌合体(MC)[1,2],并呈动态变化。造血嵌合体的动态定量检测对判断早期植入、移植物排斥和白血病复发、掌握GVHD的发生规律、实施临床干预治疗、减少移植相关并发症、提高疗效都具有重要意义。我们采用STR-PCR结合凝胶电泳成像分析技术对28例接受NASCT治疗的患者进行了嵌合体的动态监测,并对其临床意义进行了分析。  材料和方法  病例及供者  2003年1月至2005年3月在我院血液科接受非清髓异基因外周血造血干细胞移植的患者28例,男19

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