抑肽酶对犬肺移植中缺血-再灌注损伤的作用

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1、抑肽酶对犬肺移植中缺血/再灌注损伤的作用田丰，程庆书，李小飞，王小平，姜涛，周勇安，杨晔，陈连宏【关键词】肺移植　　Effectofaprotininonlungischemia/reperfusioninjuryinlungtransplantationincanines　　【Abstract】AIM：Toevaluatetheeffectofaprotininontheischemia/reperfusioninjuryofthelunginlungtransplantationincanines.METHODS:Talecanineslydividedintotlyassignedt

2、odonors(n=5)andrecipients(n=5).Therecipientsreceivedeitheraprotinin25U/kgiv.infusion(GroupI)orequivalentvolumesof50g/Lglucosei.v.(GroupII)beforereperfusion.Thelungtissuesamplesonaryyeloperoxidase(MPO)activity,contentofMDAandnitricoxide(NO)easured.Microscopicexaminationoflungsonaryin・g),thecontento

3、fMDA(017±0004nmol/mg・prot)andthecontentofNO(1260±873nmol/mg・prot)ingroupIin・g),(029±0010nmol/mg・prot)and(3509±1373nmol/g・prot)(P005).ThemicroscopicexaminationshoaformationinthealveolarspaceingroupII,butthechangesia/reperfusioninjuryinlungtransplantationincanine.　　【Keyin・g)显著(P＜005)低于对照组(037±010ΔOD

4、/min・g).抑肽酶组丙二醛每毫克蛋白含量(017±0004）nmol显著低于对照组(029±001）nmol.aprotinin组一氧化氮每毫克蛋白含量(1260±873)nmol显著（P＜005）低于对照组(3510±1373)nmol(P＜005).病理切片观察显示缺血/再灌注后的肺组织呈较为严重的白细胞浸润及肺水肿形成，而aprotinin组的病变程度较对照组轻微.结论：在肺移植术中使用aprotinin对肺的缺血/再灌注损伤有保护作用.　　【关键词】肺移植；抑肽酶；再灌注损伤　　0引言　　肺的缺血/再灌注(I/R)是肺移植手术中不可避免的过程，I/R损伤会严重影响移植肺功能，也

5、是肺移植失败的主要原因之一.抑肽酶（aprotinin）是从牛肺中提取的一种丝氨酸蛋白酶抑制剂.以往有研究证实在兔肺的离体再灌注模型〔1〕以及在肺保存液中〔2〕使用aprotinin可以减轻肺的I/R损伤.我们通过在犬的单侧肺移植手术中使用aprotinin，观察其对I/R损伤的作用，以期为临床肺移植过程中I/R损伤的防治、改善肺移植手术预后提供思路和参考.　　1材料和方法　　11实验动物和分组成年杂种雄性犬20只，体质量（150±25）kg.随机分为试验组与对照组，每组供体与受体各5只.　　12动物模型的建立实验动物给予30g/L戊巴比妥纳30mg/kgiv麻醉，气管插管呼吸机调节呼吸.

6、供体犬仰卧位，经胸骨正中切口进胸，切开心包，于主肺动脉根部前壁作荷包缝合后插入灌洗管，于左心耳注入肝素（1mg/kg），结扎上下腔静脉，阻断横窦，切开左右心耳，钳夹主肺动脉根部，近灌注管注入前列腺素E105mg，经灌洗管灌洗，灌洗液为EuroCollins液，温度4℃，灌洗量60mL/kg，灌注压力33～40kPa，灌注时间6～8min.灌洗结束后纯氧吹张双肺，双重钳闭气管，切下心肺，将左肺放入保存液中（4℃EuroCollins液）保存.受体犬右侧卧位，左侧第4肋间切口进胸，分别结扎切断左肺动脉、左肺静脉3支及左主支气管，将左肺切除，将供肺移入左胸腔内并进行原位移植，吻合完毕后恢复循环和

7、通气.试验组于手术开始后至再灌注之前给予aprotinin静滴（25u/kg，溶于50g/L葡萄糖溶液中），对照组给予同等容积的50g/L葡萄糖溶液.　　13标本采集再灌注1h后取左肺上叶组织，一部分放入40g/L甲醛中固定，一部分研磨为组织匀浆，4000r/min匀速离心20min，取上清液，一部分留作测湿干重比.　　14检测指标和方法　　141肺组织丙二醛（MDA）含量取肺组织匀浆上清，用硫代巴比妥酸（TBA）法，利