自身免疫病中多种自身抗体的检测及分析

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1、自身免疫病中多种自身抗体的检测及分析【摘要】目的：通过对自身免疫病患者常用自身抗体的综合检测、分析，评价其在自身免疫病中的意义及价值。方法：选取临床上已确诊为自身免疫病患者216例作为疾病组（其中SLE患者102例，RA患者54例，MCTD患者18例，SS患者16例，PSS患者16，PM/DM患者10例），健康体检者30例作为对照组，抽取血液，分离血清，分别采用间接免疫荧光法、欧蒙免疫印迹法和ELISA法检测ANA、抗dsDNA、ENA多肽谱、RF。结果：6种自身免疫性疾病中，RF的阳性检出率以类风湿性关节炎（RA）患者为最高（74

2、.2%），干燥综合症（SS）患者次之（62.5%），而多发性皮肌炎（PM/DM）患者中未检出；ANA在6种自身免疫病患者中均有较高的阳性检出率，以系统性红斑狼疮（SLE）患者为最高（94.1%），混合性结缔组织病（MCTD）患者次之（88.9%），RA患者最低（33.3%）；抗dsDNA则只在2种自身免疫病患者中检出，其中SLE患者阳性检出率最高（80.4%），而RA患者较低（3.7%）；6种自身免疫病患者中，ENA多肽谱的各种抗体的检出率差别较大，其中，抗SSA/R0均有检出，但阳性率不高（均低于40.0%），而抗Histone

3、s只在SLE患者中有检出，抗Scl70只在系统性硬皮病（PSS）患者中有检出，抗J01则只在PM/DM患者中有检出，但抗U1snRNP则在MCTD患者中检出率较高（88.9%），抗Centromere均无检出。结论：自身免疫病患者同时检测多种自身抗体有助于疾病的特异性诊断和筛查。【关键词】RF；ANA；抗dsDNA；ENA多肽谱；自身免疫病［ABSTRACT］Objective:Toevaluatethesignificanceofmultipleautoantibodydetectionandanalysisinthepro

4、cessofdiagnosingandscreeningautoimmunediseases.Methods:216casesofautoimmunediseasesongsixkindsofautoimmunediseasesmentionedabove,RAhasthehighestpositiverateofRF(74.2%)follomunediseasesareobviousdifferentamongeachother.Conclusion:Detectionofmultipleautoantibodiesisausefu

5、lmunediseases.［KEYCTD、SS、PSS和PM/DM6种）的常见自身抗体（ANA、RF、抗dsDNA、ENA多肽谱）进行检测，并对其结果进行综合分析，以探讨其在自身免疫性疾病中的意义与价值。1材料与方法1.1材料选取本院经临床诊断确诊为系统性红斑狼疮（SLE）患者102例，类风湿性关节炎（RA）患者54例，混合性结缔组织病（MCTD）患者18例，干燥综合症（SS）患者16例，系统性硬皮病（PSS）患者16例，多发性皮肌炎（PM/DM）患者10例；另外选取30例健康体检者作为对照组。空腹抽血，分离血清，备用。1.2方法

6、1.2.1RF检测采用采用ELISA法采用事先用包括RFIgG、RFIgA、RFIgM抗原包被孔，将受检样品、阴阳性对照标本和酶标抗体及终止液按一定程序加入包被孔内，反应终止时，通过定量检测包被孔内有色物质的含量来检测RFIgG、RFIgA、RFIgM的含量。试剂为德国欧蒙（杭州）医学实验诊断有限公司生产，采用全自动酶标仪。1.2.2ANA检测采用间接免疫荧光法将患者血清以1∶100、1∶250、1∶500、1∶1000稀释后滴加于包被有HEp2细胞的膜条上，血清中的特异性抗体与固相上细胞中的抗原结合，再滴加荧光素标记的

7、抗人抗体，与已经结合的抗体反应，若血清中有特异性的抗体，呈现特异性的荧光，荧光显微镜下观察，荧光强度与抗体滴度相关。试剂由德国欧蒙（杭州）医学实验诊断有限公司生产。朱洪等.自身免疫病中多种自身抗体的检测及分析1.2.3抗dsDNA检测采用间接免疫荧光法将患者血清以1∶100、1∶250、1∶500、1∶1000稀释后滴加于包被有绿蝇短膜虫的生物薄片上，血清中的特异性抗体与固相上细胞中的抗原结合，再滴加荧光素标记的抗人抗体，与已经结合的抗体反应，若血清中有特异性的抗体，呈现特异性的荧光，荧光显微镜下观察，荧光强度与抗体滴度相关。试剂由德

8、国欧蒙（杭州）医学实验诊断有限公司生产。1.2.4ENA多肽谱检测采用欧蒙免疫印迹法将核抗原印迹于干硝化纤维膜上，封闭其特异反应区，检测时膜条与稀释的患者血清共同孵育，使血清中的抗体与膜条上的抗原结合，再利用辣根过氧化物