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1、血小板衍生膜微粒对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响论文仲悦娇,陈宝安,黄成垠,李翠萍,高峰,费菲,裴孝平【摘要】本研究探讨血小板衍生膜微粒(plateletderivedmembranemicroparticles,PMP)对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)增殖和凋亡的影响。用不同浓度的凝血酶激活血小板释放出PMP,采用流式细胞术检测PMP的释放量.freell凝血酶激活血小板后PMP的释放率分别为28.7、47.7、50.1和43.9%;HUVEC的增殖与PM
2、P呈剂量依赖关系。在培养液中添加40μg/mlPMP时,HUVEC增殖是空白对照组的1.8±0.3倍;10μl/ml血管内皮细胞生长因子(VEGF)组的HUVEC增殖是空白对照组的1.9±0.5倍,两组之间无统计学差异,(p0.05);PMP能抑制HUVEC的凋亡,40μg/mlPMP组的细胞凋亡率为(3.9±0.4)%,明显低于空白对照组的细胞凋亡率(9.4±0.5)%(p0.05)。VEGF(10μl/ml)对HUVEC细胞的凋亡无明显抑制作用,其凋亡率为(8.0±0.8)%。结论:用1U/ml的凝血酶刺激血小板释放的PMP较
3、为均一,且释放量最大,可促进HUVEC细胞的增殖并抑制其凋亡。【关键词】细胞凋亡EffectsofPlateletderivedMembraneMicroparticlesontheProliferationandApoptosisofHumanUmbilicalVeinEndothelialCellsDepartmentofHematology,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;1JiangsuProvinceBloodCenter,Nanjing2
4、10042,ChinaAbstractThisstudyembranemicroparticles(PMP)ontheproliferationandapoptosisofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC).Differentconcentrationsofthrombinetry(FCM)bintoreleasePMPs.ByusingtheHUVECcultivatedinvitroasvector,theeffectsofPMPsontheproliferationandapo
5、ptosisofHUVECplateletsactivatedby2.0,.freellthrombinanner.Attheconcentrationof40μg/mlPMPs,theproliferationrateofHUVECesasmuchasblankcontrol,theproliferationrateingroupofvascularendothelialgroesofasmuchasblankcontrol,therel)l)didnotsuccessfullypreventedapoptosisofHUVEC
6、lthrombingetsthebestefficiencyofPMPrelease,ulatesproliferationofHUVECandinhibitsitsapoptosis.Keyicroparticle;humanumbilicalveinendothelialcell;proliferation;apoptosis血小板衍生膜微粒(plateletderivedmembranemicroparticles,PMP)是在血小板活化或降解过程中产生的直径为0.1-1.0μm的小囊泡颗粒,它含有多种特异性膜糖蛋白和生物
7、活性受体,可通过与靶细胞的相互作用启动靶细胞的生物学效应。研究表明,PMP可促进人造血干细胞、平滑肌细胞、骨细胞等的增殖。最近研究证实了血管生成因子(FGF2和VEGF)的水平与PMP水平有着很强的相关性[1],PMP能刺激内皮细胞增殖、迁移并影响细胞形态[2],促进血管生成的发生和肿瘤的转移[3],PMP有促进伤口和溃疡愈合的功能,而且不同的血小板内复合物能调控血管生成的不同阶段。本研究通过PMP与人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)共同孵育观察PMP对HUVEC
8、生长的影响。RPMI1640干粉系美国Gibco公司产品。小牛血清为杭州四季青生物工程公司产品,EDTA(二乙烯四乙酸二钠)溶液,MTT试剂为Fluka公司产品,血管内皮细胞生长因子(VEGF)为Sigma公司产品,流式细胞仪为BectobnDic