组织芯片技术研究肺鳞癌高迁移率蛋白a1表达

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1、组织芯片技术研究肺鳞癌高迁移率蛋白A1表达：黄薇何常杨婷冉鹏杨勤【摘要】目的：应用组织芯片(tissuechip)-组织微阵列(tissuemicroarray，TMA)技术结合免疫组织化学的方法检测肺鳞癌组织中高迁移率蛋白A1（highmobilitygroupA1，HMGA1)的表达情况,以明确HMGA1蛋白表达与肺鳞癌发生的关系及临床意义。方法:用组织阵列仪制备组织芯片,切片后采用免疫组织化学的方法检测组织芯片上25例肺鳞癌肿瘤组织和18例对照组肺组织样本中的HMGA1的表达情况，并分析其表达与各临床病理学参数之间的相

2、关性。结果:HMGA1蛋白在肺鳞癌组和对照组的阳性表达率分别为68.0%(17/25)、16.7%(3/18),两者比较差异具有显著性(P<0.05);HMGA1阳性表达与性别、年龄无关(P>0.05),而与淋巴结转移及组织学分级有关(P<0.05)。结论:肺鳞癌的发生、发展可能与HMGA1的表达上调密切相关，HMGA1有望成为肺鳞癌诊治中的1个新的标志物；临床上，检测HMGA1蛋白对判断肺鳞癌的预后和指导治疗可能具有一定的参考价值。【关键词】肺肿瘤;免疫组织化学；组织芯片;高迁移率蛋白A1［Abstrac

3、t］Objective:TodeterminetherelationshipofhighmobilitygroupA1protein(HMGA1)expressionentoflungsquamouscancer,anditsclinicalsignificance.Methods:Tissuechip/tissuemicroarray(TMA)techniquebinedmunohistochemistrymethodouscancer,andthecorrelationbetouscancer.Aseriesoftiss

4、uechipsensfrom25casesoflungsquamouscancerand18casesofcontrollungtissuesmunohistochemicallyonatissuechipforHMGA1proteinexpressionanditscorrelationtoclinicpathologicalparamterphoidmetastasisandhistologicalclassificationsoflungcancer(P<0.05)too.Nosignificantrelatio

5、nshipayrelateisingforHMGA1tobeeanearkerfordiagnosisoflungsquamouscarcinoma.ClinicaldetectingofHMGA1couldhelpent-guidingoflungsquamouscancer.［Keys;immunohistochemistry;tissuechip;highmobilitygroupA1　　肺癌的生长、浸润和转移是多种因素综合作用的结果,包含多种原癌基因的激活、抑癌基因的失活和多种细胞因子的结构和功能的异常表达。HMGA

6、1是一种广泛存在于真核生物细胞中非常重要的结构转录因子，它在人体的胚胎发育、肿瘤形成过程中发挥着至关重要作用，近几年研究发现，HMGA1表达与人类肿瘤的发生有关，HMGA1基因被视为癌基因［1］。2007年采用TMA技术结合免疫组织化学的方法检测了25例肺鳞癌肿瘤组织及18例对照组肺组织中HMGA1蛋白的表达,以期验证其在肺鳞癌组织中的表达及与肺鳞癌发生、发展的关系，探讨肺鳞癌发生的分子生物学机制，为肺鳞癌诊治及预后判断标志物奠定基础。1材料和方法1.1材料实验组来自2002-2004年贵阳医学院附属医院手术切除的肺鳞癌标本

7、25例,男17例,女8例。年龄46～75岁。所有病例术前均未行放、化疗。按照世界卫生组织(GA1表达。HMGA1多克隆抗体购于美国Abcam公司，工作浓度为1∶50，SABC试剂盒及DAB显色液均为武汉博士德公司产品，按说明书步骤进行。切片常规化蜡下行至水,3%H2O2封闭内源性过氧化物酶10min,微波修复，5%BSA封闭液封闭,滴加一抗置于4℃冰箱湿盒过夜。次日取出切片，依次加入生物素标记的二抗和过氧化物酶标记的链酶亲和素-生物素-酶复合物（Strept-Avidin-Biotinplex，SABC），置于37℃水浴箱各

8、孵育20min，DAB显色，苏木素复染,上行，封片观察。1.3评定标准显微镜下对每一个微阵列点进行观察并评分。每个组织取3个点，计数每个点总细胞数和阳性细胞的平均数，阳性细胞率<5%为阴性，阳性细胞率>5%为阳性。HMGA1表达阳性表现为在细胞浆和(或)细胞核内着棕黄色。1.4