食管鳞癌组织芯片中mta1蛋白表达的免疫组织化学研究

《食管鳞癌组织芯片中mta1蛋白表达的免疫组织化学研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究作者：钱海利，李云峰，于静，宋崇文，吕宁，张雪燕，梁萧，付明，林晨【摘要】目的研究食管鳞癌组织中转移相关基因MTA1蛋白定位及表达水平的改变及与食管鳞癌进展、转移的关系。方法应用食管鳞癌组织芯片通过免疫组织化学染色研究MTA1蛋白在食管癌中的表达情况。结果MTA1蛋白在食管鳞癌组织中主要定位于胞核，在淋巴结转移灶中出现胞浆与胞核同时着色。正常组织与重度不典型增生、原位癌及癌组

2、织之间差异有统计学意义，在食管鳞癌不同进展阶段的组织中MTA1表达逐渐升高，并且出现异位表达。结论MTA1与食管鳞癌的侵袭和转移高度相关，在食管鳞癌的发展过程中可能发挥着重要作用，可作为判断食管癌侵袭及转移能力的辅助因子。【关键词】食管鳞癌；MTA1；转移；组织芯片在肿瘤细胞的生物学特征中，以侵袭性和转移性最为关键，也是恶性肿瘤的最重要标志，因此，对肿瘤转移机制及治疗方法的研究显得十分迫切。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义

3、的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果MTA1是一个在肿瘤转移过程中表达上调的基因。它是Toh等用差异cDNA文库扫描技术从高转移大鼠乳腺腺癌细胞系中发现的，随后用同源方法发现了人的同源MTA1基因[1]。该基因产物是核小体重塑与脱乙酰基复合体(nuclearremodelinganddeacetylationcomplex，NuRD)的成分，通过影响染色质的状态来调控基因转录[2]。Toh等研究还发现，MTA1在食管癌中的表达与其H4组蛋白的脱乙酰基活性相关[3]。经典的抑癌基因如p53、p21和Rb基因都受组蛋白乙酰

4、化的调控[4]。高表达MTA1mRNA的肿瘤细胞侵袭与淋巴结转移率明显升高。有鉴于此，我们对食管癌中的MTA1蛋白表达进行研究，确定MTA1基因在食管鳞癌中表达情况，以及该表达水平与肿瘤临床行为的相关性，为进一步探讨其在食管癌转移过程中的可能分子机制打下基础。1材料与方法抗体羊抗人MTA1多克隆抗体HRP标记羊抗鼠IgG食管癌组织芯片临床病理资料食管癌组织芯片由中国医学科学院肿瘤医院病理科吕宁教授提供。芯片共包含72例食管鳞癌患者的组织样本，就诊时间为XX～XX年。其中癌旁正常鳞状上皮组织67例，重度不典型增生组织42例，侵袭性癌组织70例，淋巴结转移癌组织

5、20例。免疫组织化学染色步骤课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果组织标本石腊包埋切片，常规脱腊至水；枸橼酸盐缓冲液进行抗原修复；1∶200稀释一抗，37℃作用1h；生物素标记的二抗IgG，37℃孵育30min；加HRP标记的链霉卵白素37℃作用30min；冲洗后DAB显色复染封片。免疫组织化学评分MTA1各种组织中的核染色评分标准如文献[5]所述。最终

6、评分范围为0～12分。我们将最终评分8～12定义为强表达，4～为中等表达，0～4为弱表达。MTA1蛋白的细胞浆染色按以下标准来进行：阳性，组织中细胞浆着色的细胞数≥20%；阴性，组织中上皮细胞或肿瘤细胞的细胞浆着色数统计学处理实验中的数据分析用进行分析。食管癌不同发展阶段组织之间以及不同侵袭程度组织之间MTA1表达差异用方差分析进行显著性检验。细胞浆与细胞核MTA1阳性率差异用双侧卡方检验进行显著性分析。P结果.1不同进展阶段食管鳞状细胞癌的MTA1的表达水平课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有

7、恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果组织芯片染色质量满意，见图1。在正常食管鳞状上皮细胞，MTA1蛋白在细胞核中低表达，而在不典型增生细胞中，MTA1表达水平增高。在侵袭性癌细胞与转移癌细胞中，MTA1阳性细胞数量及染色强度均明显增高。在研究的样本中，从正常食管鳞状上皮到侵袭癌细胞，MTA1核表达水平随着肿瘤发生阶段的进展而升高，见图2a～c。2例正常食管鳞状上皮、不典型增生、侵袭癌和淋巴结转移癌的MTA1表达评分分别为±,±,.28±和±。不典型增

8、生细胞、侵袭癌细胞与转移癌细胞细胞中MTA1表达水平