何首乌蒸制后结合型蒽醌含量与泻下作用相关性研究论文

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1、何首乌蒸制后结合型蒽醌含量与泻下作用相关性研究论文赵荣华赵声兰毛晓健解奉江刘珍珍【摘要】目的探讨何首乌高温清蒸后泻下成分与泻下作用的关系，为制订制何首乌的质量标准提供依据。方法用紫外分光光度法测定何首乌中两种饮片规格（块0.8～1cm,厚片2～4mm）蒸制过程中的结合型蒽醌含量,观察小鼠服用两种规格制何首乌饮片的泻下作用。结果何首乌块（0.8～1cm）清蒸6h无泻下作用，结合型蒽醌含量为2.09mg/g；何首乌厚片（2～4mm）清蒸4h无泻下作用，结合型蒽醌含量为2.0mg/g。结论何首乌高压蒸制后无泻下作用，结合型蒽醌含量明显降低，可考虑将结合型蒽醌含量作为制何首乌的限定指标

2、。【关键词】何首乌结合型蒽醌泻下作用何首乌为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根。何首乌生用具有润肠通便的作用，制后有补肝肾、强筋骨、乌须发的作用。何首乌炮制的关键是降低结合型蒽醌的含量，去除泻下的副作用。目前《中国药典》2005年版［1］制何首乌项下仅有二苯乙烯苷的含量测定.freel之间,以下同)和厚片(厚度在2～4mm之间,以下同)蒸制后结合型蒽醌含量与泻下作用的关系，可以为制订制何首乌质量标准提供科学依据。1仪器与材料1.1仪器7520型可见-紫外分光光度计（上海分析仪器厂）。1.2药品与试剂对照品大黄素由中国药品生物制品检定所提

3、供（批号0756-200110，含量测定用），所用氯仿、甲醇、硫酸、乙酸镁等试剂均为分析纯试剂，水用纯净水。显色剂用1%乙酸镁甲醇溶液。何首乌药材样品来自云南省绿劝县，经云南中医学院中药鉴定教研室廖心荣教授鉴定为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的块根，人工切成两种大小不同的规格：块0.8～1cm，厚片2～4mm。1.3动物昆明种小鼠，18～22g，购自昆明医学院，雄雌各半。2方法与结果2.1样品的制备取何首乌块9份，每份200g，每份用200ml水浸润，润透后放入高压锅中的竹皿中，120℃蒸制，蒸制时间分别为0.5，1，2，3，4，6，8，10

4、，12h；取何首乌厚片5份，每份200g，每份用200ml水浸润，润透后，放入高压锅中的竹皿中，120℃蒸制，蒸制时间分别为2，3，4，5，6h，每一个温度段有3份样品，蒸好后置电热鼓风干燥箱中80℃干燥，至干，含水量为10%，备用。2.2受试药物的提取分别取生首乌、0.8～1cm块状何首乌清蒸0.5，1，2，3，4，6，8，10h和2～4mm厚片何首乌清蒸2，3，4，5，6h的炮制品各10g，加入索氏提取器中用甲醇提取12h，回收甲醇后加纯水溶解至8ml备用。2.3结合型蒽醌含量的测定2.3.1对照品溶液的制备准确称取大黄素对照品10.40mg，用甲醇溶解并定容于10ml容量

5、瓶中，即得浓度为1.04mg/ml的储备液。取3.00ml储备液，以甲醇定容于100ml容量瓶中，即为31.2μg/ml的对照品溶液。2.3.2标准曲线的绘制参照文献［2］乙酸镁显色比色法，选定最大吸收波长为512nm，样品在显色后15～60min内吸收度稳定，因而选择在显色15min后测定。分别吸取大黄素对照溶液2ml，平行显色后测定，吸光度值RSD=0.5%（n=5）。分别准确吸取大黄素对照品溶液0.5，1.0，3.0，5.0，6.0ml置于10ml容量瓶中，各加2.5ml醋酯镁显色剂，再用甲醇定容并混匀显色。显色后15min，以显色液为空白，于512nm处分别测定其吸光度

6、（A），数据回归处理，得回归方程为：A=41.1C+0.009052，r=0.9992（n=5），C=mg/ml。2.3.3样品溶液的制备精确称取样品约1g(过60目筛)，置索氏提取器中，加入100ml氯仿，在沸水浴上回流2h，经检查游离蒽醌提尽后，回收氯仿液，药渣以100ml甲醇继续于沸水浴上回流提取结合型蒽醌，约2h经检查结合型蒽醌提尽后，回收甲醇液，然后加入15%的硫酸溶液40ml氯仿30ml，于沸水浴上回流水解约4h，经检查水解完毕后，水解液置分液漏斗分取氯仿层，上层水相用45ml氯仿分2次萃取。合并氯仿液，适量纯净水返洗pH至6左右，回收氯仿，残留物用甲醇溶解，转移至

7、10ml容量瓶中，并用甲醇定容至10ml，作为结合型蒽醌的供试品溶液。2.3.4重复性实验分别精确称取同一样品5份，按上述方法制备供试品溶液，并测定含量，结果显示游离蒽醌含量（mg/g）的RSD=2.85%；结合型蒽醌含量（mg/g）的RSD=1.66%，符合测定要求。2.3.5回收率实验分别精确称取同一样品5份，定量精确加入大黄素对照品，按照上述制备游离蒽醌方法制备供试品溶液，并测定含量。经过氯仿提取的残渣，再定量精确加入大黄素对照品，按照上述方法制备结合型蒽醌供试液，并测定含量，结果显示