生物技术大实验教学大纲

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1、生物技术大实验教学大纲课程名称：生物技术大实验英文名称：ComprehensiveExperimentsofBiotechnology课程性质：专业实验课程代码：20412150本大纲主笔人：赵云王茂林面向专业：生物技术、生物科学实验指导书名称：出版单位：出版日期：主编：实验讲义名称：生物技术大实验编写单位：生命科学学院编写日期：2002主编：赵云王茂林一、课程学时学分课程总学时：课程总学分：实验总学时：119实验总学分：5二、实验的地位、作用和目的生物技术是生命科学与工程技术相结合的一门高新技术，生物技术大实验是一门系统

2、综合性很强的实验课程。在生物技术本科专业课程中占有十分重要的地位，对于培养学生的动手能力、创新能力和综合分析能力都具有十分重要的作用。本课程的目的是通过创新性、系统性、高效性和科学性的实验实践课程学习，掌握常见现代生物技术的基本原理和基本的实验技能，培养学生的动手能力、创新能力和综合分析能力。三、基本原理及课程简介本实验课程主要包括基因工程和细胞工程两部分的内容。基因工程是整个生物技术的核心，实验内容包括“质粒载体DNA的提取、酶切与脱磷酸化”，“细菌总DNA的提取、部分酶切与片段回收”、“DNA分子的体外重组”、“DNA

3、分子杂交”、“植物总DNA的提取及特定序列的PCR扩增”等。细胞工程技术是现代生物技术的重要组成部分，它包括细胞的克隆技术、细胞的遗传改良技术和细胞的长期保存技术。本实验的内容，能够应用于医疗保健、制药、农业、畜牧业、食品、能源和环境诸领域本实验内容不但注重与基因工程和蛋白质工程等其它生物技术紧密结合，而且还尽可能与我国经济建设的主战场相结合，选择我国特有尤其是西部特有的野生资源和主要作物为材料开设（珍惜濒危生物的快速克隆技术、重要农作物和药用植物的细胞杂交和细胞转化技术、珍惜濒危生物种质的长期保存技术等），为我国经济和西

4、部大开发服务四、实验方式及基本要求基本要求：掌握生物技术尤其是基因工程、细胞工程最基本的实验技术。五、实验报告每次实验均要求写出实验报告。内容包括实验原理，实验目的，实验步骤，实验记录，数据分析，最后是对结果进行分析小结。六、考核与考试考核七、基本设备与器材配置（名称及数量）序号仪器设备名称型号、规格台件数1电子天平（便携式）SE2020，0-200g/0.01g42电子天平(分析)FA1004，100g/0.1mg23冰柜314L44台式恒温器BI-52525超净工作台SW-SF-1F46台式离心机Eppendorf,5

5、415D67台式离心机5000r/min,LD5-2A28冷冻离心机Eppendorf,5804R49转头TypeF-45-30-12,30×1.5/2.0ml410转头TypeF-40-6-38,6×85ml211转头TypeA-2-MTP,4×100ml212蛋白核酸检测仪Vic/UV213液氮罐YDS-35-125414电冰箱（海尔）300L615旋涡振荡器WH-8511016生化培养箱HPS-250417恒温振荡培养箱HZQ-X100618全温恒温振荡培养箱HZQ-F219低温冰箱MDFU2086,-86℃,180

6、L120电泳仪15-600V,2.5-100A1221水平电泳槽DYY-Ⅲ31A型622DYY-Ⅲ31B型623DYY-Ⅲ31C型624DYY-Ⅲ32型625DYY-Ⅲ34A型426微量移液器(100-1000ul)HTL20支27微量移液器(20-200ul)HTL20支28微量移液器(2-20ul)HTL20支29微量移液器(0.5-10ul)HTL20支30电热蒸馏水器HSZ115，5升131鼓风电热干燥箱80×80×100232超纯水器Millipore-Q,133凝胶成像系统（国产）234PH计PHS-3C435

7、超声波清洁器SG28-600436微波炉国产1037高压灭菌锅YXQDY-220438磁力搅拌器90型2039水浴锅二孔440DNA真空印迹仪Model785,20×25cm241放射计量器IS-7515-1242杂交箱LF-11八、实验项目及内容提要实验室名称：序号实验名称内容提要实验性质实验类别现有套数每组人数实验时数备注（学分）1质粒载体DNA的提取、酶切与脱磷酸化采用快速碱法制备质粒DNA。采用不同的内切酶对质粒DNA进行酶切，了解影响酶切的因素专业综合20262细菌总DNA的提取、部分酶切与片段回收采用化学试剂如

8、去污剂、蛋白变性剂、溶菌酶或蛋白酶等处理是细菌细胞壁（膜）破裂，释放可溶的高分子量DNA，采用离心，苯酚，氯仿抽提以除去DNA以外的成分，最后乙醇沉淀DNA。专业综合20263DNA分子的体外重组DNA体外重组技术主要是将外源DNA片段与载体DNA在体外进行连接，并转入受体细胞，使其进行无性繁殖或表达。