不同强度运动后大鼠心肌细胞热休克蛋白72 mrna的表达

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1、不同强度运动后大鼠心肌细胞热休克蛋白72mRNA的表达杨德洪（上海应用技术学院体育教育部漕宝路120号上海200235）摘要热休克蛋白（heatshockproteins,HSP）是一种古老的保护性蛋白，存在于整个生物界，具有普遍的生物学意义。运动可以诱导HSPmRNA在生物体不同组织器官内表达。本研究在进一步证实运动可以诱导大鼠心肌细胞表达HSPmRNA的同时，试图明确不同运动强度及运动持续时间是否对心肌细胞HSPmRNA的表达有不同的影响，探讨是否存在诱导心肌细胞表达HSPmRNA的最适宜运动强度，为进一步研究运动性心脏提供思路。关键词热休克蛋白运动适应心肌细胞负荷1.实验材料和方法1

2、.1实验动物和喂养健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠60只，体重为180～220g，购自上海计划生育研究所西普而—必凯实验动物有限公司，随机分为安静对照组（C组）、低强度（60%VO2max）运动组（Ta组）、中等强度（75%VO2max）运动组（Tb组）和高强度（85%VO2max）运动组（Tc组）。每一运动组又分成1、2、3天运动组，每组6只。分笼饲养，饲养笼选用塑料制品，并配用不锈钢罩、玻璃吸水瓶和不锈钢吸水管，国家标准啮类类动物固体混合饲料喂养，自由饮食。动物室温度22～28°C，相对湿度50%～55%。常规适应性喂养1周后，大鼠在可调式大鼠电动跑台上进行慢跑适应，速

3、度为10－12米／分，每次慢跑距离不超过100米，共进行2天。2天后，以10米／分速度跑3分钟，15米／分跑3分钟。1.2训练方法训练强度参考Bedford(1979)大鼠跑台运动负荷确定原则。在大鼠适应训练后休息3天，即对大鼠进行训练。训练方式为跑台运动。安静对照组不运动，运动组每天运动1小时。Ta组、Tb组和Tc组分别以60%VO2max、75%VO2max和85%VO2max的强度进行运动，持续时间又依组别的不同分为运动一天、两天和三天。1.3样品制备实行不同运动方案后休息24小时，然后在相同时间断头处死动物，对照组也同时处死，迅速开胸取出心脏，剔除筋膜等周围组织，于0~4℃生理盐水

4、中洗去血液，滤纸吸干后置_72℃冰箱待测。1.4大鼠心肌细胞HSP72mRNA的检测采用RT-PCR法。1.5统计处理方法实验数据由SAS统计软件包处理，组间比较采用t检验，显著性标准为p<0.05。2.实验结果2.1对照组大鼠心肌细胞HSP72mRNA的表达大鼠在安静情况下心肌细胞存在HSP72mRNA的基础结构性表达。（如图2）。2.260%VO2max强度运动后大鼠心肌细胞HSP72mRNA的表达低强度（60%VO2max）运动一天后心肌细胞HSP72mRNA表达与对照组无显著性差异，随运动时间的延长，HSP72mRNA表达逐渐增加（见图2和表3）。HSP72β-MG图260%VO2

5、max组大鼠运动后心肌细胞HSP72mRNA表达的变化表3低强度运动后大鼠心肌细胞HSP72mRNA表达的变化C组T1组T2组T3组0.52±0.050.83±0.081.59±0.29*2.02±0.18*注:*p<0.05，与对照组比较2.375%VO2max强度运动后大鼠心肌细胞HSP72mRNA的表达中等强度（75%VO2max）运动后心肌细胞HSP72mRNA表达随运动持续时间的延长显著增加,运动一天组、两天组及三天组心肌细胞HSP72mRNA的表达与对照组有显著性差异。但两天和三天组表达量无显著性差异。（见图3和表4）HSP72β-MG图375%VO2max组大鼠运动后心肌细胞

6、HSP72mRNA表达的变化表4中等强度运动后大鼠心肌细胞HSP72mRNA表达的变化C组T1组T2组T3组0.53±0.061.34±0.06*2.49±0.21*2.68±0.16*注:*p<0.05，与对照组比较2.385%VO2max强度运动后大鼠心肌细胞HSP72mRNA的表达高强度（85%VO2max）运动后心肌细胞HSP72mRNA表随运动持续时间的延长显著增加。同中等强度下的结果相似（见图4和表5）。β-MGHSP72图485%VO2max组大鼠运动后心肌细胞HSP72mRNA表达的变化表5高强度运动后大鼠心肌细胞HSP72mRNA表达的变化C组T1组T2组T3组0.52±

7、0.051.26±0.08*2.28±0.19*2.57±0.14*注:*p<0.05，与对照组比较3.讨论与分析HSP72mRNA虽然在非应激状态下含量非常少，但还有一定的组成性基因表达。本实验中安静对照组大鼠心肌细胞也表达有少量HSP72mRNA，进一步证明了这一点，同时也提示HSP72mRNA除了在应激时可能参与蛋白质的生理活动外，在安静时也可能有其特殊的现在还未知的作用。低强度（60%VO2max）运动后机体产生