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时间:2018-05-07
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1、人结肠癌中AKT2和PTEN蛋白表达的意义及相关性:赵红波,张小元,刘迪,刘永杰,张普【摘要】 目的检测AKT2蛋白在人结肠癌组织中的表达及其与PTEN的相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测30例正常结肠、30例腺瘤和64例结肠癌组织中AKT2和PTEN的表达。结果从正常组织、腺瘤组织到结肠癌组织,PTEN的阳性表达率呈递减趋势,AKT2呈递增趋势;PTEN在正常结肠组织中的表达明显高于结肠腺瘤和结肠癌组织中的表达,差异有统计学意义(χ2=68.855,P<0.05),而AKT2在结肠腺瘤和结肠癌组织中的表达明显高于正常结肠组织中的表达,差异有统计学意义(χ
2、2=37.574,P<0.05);随结肠癌分化程度降低、淋巴结的转移、Dukes分期的增加,AKT2的阳性表达率升高(P<0.05);PTEN与AKT2的表达呈负相关(r=-0.143,n=64,P<0.05)。结论由于PTEN表达下调或缺失而导致AKT2的异常高表达,AKT2的高表达与结肠癌的发生发展有关。【关键词】结肠癌;PTEN;AKT2;免疫组织化学法 ABSTRACT:ObjectiveTodetecttheexpressionofAKT2inhumancoloncancerandunderstanditsrelationshipalco
3、lonictissues,30patientsatissues,and64patientsatissuesbyimmunohistochemicalSPstainingmethod.ResultsThepositiveexpressiverateofPTENpresentedatrendofprogressivedecreasefromnormaltissues,adenomatissuestocoloncarcinomatissues,alcolontissuesthanincolonadenomatissuesandcoloncancertissues(χ2=68
4、.855,P<0.05).Hoatissuesandcoloncancertissuesalcolontissues(χ2=37.574,P<0.01).MAC1/TEP1基因(简称PTEN)是继P53后又一重要的抑癌基因,目前已在许多人类恶性肿瘤和遗传性肿瘤易感综合征中发现存在PTEN基因缺失或突变[12]。PTEN蛋白具有双重特异性磷酸酶活性,可依赖其脂质磷酸酶作用拮抗PI3K/AKT信号通路的活化而发挥抑癌作用[3]。本文采用免疫组织化学(SP)法检测不同结肠病变组织中AKT2和PTEN蛋白的表达,研究二者之间表达的相关性,从而探讨二者在结肠癌发生
5、、发展中的意义。 1材料与方法 1.1材料 64例结肠癌标本取自2005年6月至2008年6月在甘肃中医学院附属医院肛肠科手术切除的患者,男38例、女26例,年龄24~75岁,平均年龄为56岁;30例正常结肠组织、30例腺瘤组织取病理科送检标本;正常结肠组织中男17例、女13例,年龄为36~72岁,平均57.5岁;结肠腺瘤组织中男19例、女11例,年龄为35~76岁,平均63岁。所有标本均经过病理学证实,全部病例术前均未接受放疗、化疗;所有标本均经过40g/L甲醛溶液固定,石蜡包埋,4μm连续切片,常规HE染色。 1.2主要试剂 PTEN鼠抗人多克隆抗体、免
6、疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司,AKT2兔抗人多克隆抗体购自武汉博士德生物有限公司。工作浓度均为1∶100。 1.3免疫组织化学法 以PBS代替一抗作阴性对照,具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。 1.4结果判定 根据染色程度和染色细胞百分比进行评分。染色程度:基本不着色为0级,着色呈淡黄色为1级,着色呈黄色为2级,着色呈棕褐色为3级。染色阳性细胞百分比:着色阳性细胞占计数细胞百分比≤5%为0级,6%~25%为1级,26%~50%为2级,≥51%为3级。将胞质染色程度分级与染色细胞百分比分级相乘,乘积≥4者为表达阳性,0~3为表达阴性。 1.5统
7、计学处理 应用SPSS13.0统计软件包进行χ2检验、Pearsons相关检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1PTEN在正常结肠组织、结肠腺瘤组织及结肠癌组织中的表达 PTEN在30例正常结肠组织中有28例阳性表达,表达率为96.7%;在30例结肠腺瘤组织中16例阳性表达,表达率为53.3%;在64例结肠癌组织中仅4例阳性表达,表达率为18.8%;表达部位位于胞质和胞膜(图1);从正常组织、腺瘤组织到结肠癌组织,PTEN的阳性表达率呈递减趋势;在正常结肠组织中的表达明显高于结肠腺瘤组织和结肠癌组织中的表达,差异有统
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