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时间:2018-11-29
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1、磷酸化AKT、AKT2、PTEN在NSCLC中的表达及意义作者:苗丽君,孙振涛,王静,吴秋歌,吴逸明,吴拥军【摘要】目的探讨AKT信号转导通路中有关蛋白磷酸化AKT(pAKT)、AKT2及PTEN在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达、相关性及意义。方法应用免疫组化的方法,检测80例NSCLC组织及35例非肿瘤性肺组织标本中pAKT、AKT2、PTEN的表达,并与临床病理因素进行相关性分析。结果pAKT、AKT2在NSCLC中高表达,阳性率分别为78.8%、91.3%,显著高于非肿瘤性肺组织中的0、5.7%(P<0.05)。PTEN在NSCLC中低表达,阳性率47.5
2、%,显著低于非肿瘤性肺组织中的94.3%(P<0.05)。pAKT的表达与患者年龄、性别、组织学类型及分化程度、TNM分期、淋巴结转移无关(P>0.05)。AKT2的表达与淋巴结转移有关,在淋巴结转移组的阳性表达率100%显著高于非淋巴结转移组表达率80.6%(P<0.05)。PTEN表达与淋巴结转移、组织的分化程度有关(P<0.05)。AKT2与pAKT呈正相关(rs=0.596,P<0.01)。PTEN表达与pAKT(rs=-0.240,P<0.05)、AKT2(rs=-0.326,P<0.01)呈负相关。结论在NSCLC中存
3、在AKT的活化,PTEN表达的丢失与AKT的活化有关,AKT2是PTEN的调节形式之一。【关键词】非小细胞肺癌;pAKT;AKT2;PTEN TheExpressionandClinicalSignificanceofphosphoAKT,AKT2andPTENProtEinsinHumanNonsmallCellLungCancer Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpression,clinicalsignificanceandrelationshipofphosphoAKT(pAKT),AKT2andPTENinhuma
4、nnonsmallcelllungcancer(NSCLC)tissue.MethodsTheexpressionofpAKT,AKT2andPTENin80casesofNSCLCand35casesofnocancerouslungdiseasemunohistochemistry,andthEIrcorrelationsordifferentiation,lymphnodemetastasisandTNMstages(P>0.05).ThepositiverateofAKT2inthegroupphnodemetastasis(100.0%)phnodemet
5、astasis(80.6%)(P<0.05).TheexpressionofPTENcorrelatedphnodemetastasisanddifferentiationofNSCLC(P<0.05).Inaddition,PositivecorrelationsaybepresentinNSCLC.ThelossofexpressionofPTENmaycorrelatetoactivationofAKT.AKT2maybeoneofregulatedformsofPTEN. Keyolognedeletedonchromosome10,PTEN)位于此通路的
6、上游,能够负性地调节该通路的活化[3]。本研究通过免疫组化的方法检测AKT通路中有关蛋白pAKT、AKT2、PTEN在NSCLC中的表达、关系及意义。 1材料与方法 1.1研究对象 收集郑州大学第一附属医院及河南省胸科医院2002~2004年胸外科手术切除并经病理确诊的原发性NSCLC标本80例,其中男53例,女27例;年龄18~78岁,平均年龄60岁。所有患者术前均未接受化疗、放疗和其他治疗。非肿瘤性肺组织标本35例(支气管扩张10例,肺结核18例,炎性假瘤7例)作为对照组,男22例,女13例,年龄22~72岁。 1.2试剂 兔抗人PhosphoAKT(Ser4
7、73)单克隆抗体(产品号:3787)为美国CellSignalingTechnology公司产品,购自北京吉比埃生物技术有限公司。兔抗人AKT2多克隆抗体购自武汉博士德公司。兔抗人PTEN多克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色剂均为美国Zymed公司产品,购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.3实验方法 采用SP染色法检测蛋白的表达,pAKT抗体(高压修复,工作浓度1∶25)、AKT2抗体(微波修复,工作浓度1∶100)和PTEN抗体(微波修复,工作浓度1∶50)。用PBS(AKT2、P
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