苦参碱抑制人雄激素非依赖性pc3细胞增殖和诱导凋亡的研究

《苦参碱抑制人雄激素非依赖性pc3细胞增殖和诱导凋亡的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、苦参碱抑制人雄激素非依赖性PC3细胞增殖和诱导凋亡的研究：张鹏，王子明，纪宗正，种铁，黄辰，高彩霞【摘要】目的研究苦参碱对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法不同浓度苦参碱作用PC3细胞后，应用MTT法观察苦参碱对PC3细胞增殖的影响，流式细胞仪研究苦参碱对PC3细胞周期的影响，TUNEL法、AnnexinV/PI双染分析苦参碱对PC3细胞凋亡的影响。结果苦参碱对PC3细胞的生长具有抑制作用，与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。苦参碱对PC3细胞的增殖抑制作用呈现时间及剂量依赖性关系。苦参碱的最佳药物

2、浓度为1.0g/L，最佳作用时间为48h。流式细胞仪分析显示不同浓度苦参碱均可使PC3细胞阻滞于G0/G1期，随着苦参碱浓度的增加，G0/G1期细胞所占的比例增加，与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。TUNEL法、AnnexinV/PI分析显示不同浓度苦参碱均可诱导PC3细胞凋亡，其早期凋亡率及晚期凋亡率随着苦参碱浓度的增加而升高，呈现剂量依赖性关系(P<0.05，P<0.01)。结论苦参碱在体外可抑制PC3细胞的增殖，具有时间和浓度依赖关系。抑制增殖和细胞周期阻滞与G0/G1期相关。苦参碱可诱导PC3细胞凋亡，与苦参碱的作用浓度及

3、时间有关。【关键词】前列腺癌;苦参碱;细胞凋亡　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofmatrineontheproliferation,cellcycle,apoptosisofandrogenindependentprostatecancer(AIPC)celllinePC3invitro.MethodsPC3cellsatrine.TheinhibitoryeffectofmatrineontheproliferationofPC3cellsethod.ThecellcycleofPC3cellstr

4、eatedbymatrineetricassay.ApoptosisofPC3cellsinducedbymatrineinedatrinehadaninhibitoryeffect,thatofcontrols(P<0.05).MatrinemarkedlyinhibitedcellproliferationofPC3indoseandtimedependentmanners.Theoptimaldoseofmatrineeofinhibitionetricassayshoatrineatrinedose,thatofcontrols(P<0

5、.01).TUNELandAnnexinV/PIstainingassayshoatrinecouldobviouslyinducetheapoptosisofPC3cells.TheratioofearlyandlateapoptosisofPC3cellstreatedbymatrineanner(P<0.05,P<0.01).ConclusionMatrinecouldinhibittheproliferationofPC3cellsindoseandtimedependentmannersinvitro.Theinhibitionme

6、chanismightbeassociatedeofmatrine.　　KEYA)是中药苦参的主要有效成分[1]。研究表明苦参碱对肺癌、卵巢癌等的细胞生长具有抑制作用[23]，这种作用与其诱导肿瘤细胞凋亡有关。本实验通过不同浓度的苦参碱作用于AIPC细胞株PC3，研究苦参碱对PC3细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1细胞株人AIPC细胞株PC3由西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室提供。该细胞系于一位62岁白人男性前列腺癌患者的骨转移灶，其酸性磷酸酶和5α还原酶活性低，不产生前列腺特异性抗原(pros

7、tatespecificantigen,PSA)，不表达雄激素受体。　　1.1.2主要试剂苦参碱由西安鸿生生物科技有限公司惠赠，纯度>980g/L。胎牛血清、RPMI1640培养液、四甲基偶氮唑蓝溶液(MTT)、碘化吡啶(PI)均购自美国GIBCO公司。二甲亚砜(DMSO)购自美国Sigma公司。TUNEL检测试剂盒、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒均购自武汉博士德公司。AnnexinV/FITCapoptosisdetectionkitⅠ购自美国BD公司。　　1.1.3主要仪器高通量多功能微板测试系统购自德国BMGLABTECHNOLOGIES公司。FA

8、SCali