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《姜黄素体外诱导人乳腺癌mcf7细胞凋亡作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、姜黄素体外诱导人乳腺癌MCF7细胞凋亡作用：孙黎刘正泉罗强薄爱华【摘要】目的:观察姜黄素对人乳腺癌MCF7细胞(简称MCF7细胞)凋亡的诱导作用。方法:不同浓度姜黄素(0.048，0.056，0.064，0.072，0.080μmol/L)作用于MCF7细胞24h,采用CCK8法检测其对MCF7细胞的生长抑制作用;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡结果。结果:经上述不同浓度姜黄素诱导24h后，MCF7细胞生长抑制率分别为17%、28%、48%、50%及55%;琼脂糖凝胶电泳显示出DNA梯形条带。结论：姜黄素对体外培养MCF7细胞的增殖有明显的抑制作用并可诱导
2、其细胞凋亡。【关键词】姜黄素;人乳腺癌MCF7细胞;细胞凋亡 【ABSTRACT】Objective:TostudytheeffectsofCurcumininducingapoptosisofMCF7cells(humanbreastcancerMCF7cellsiscalledMCF7cellsforshort).Methods:Curcuminol/L)effectedonMCF7cells,andafter24heffectsofCurcuminongroethodsofCCK8andcellapoptosis,ethodsofagarosege
3、lelectrophoresis.Results:BytheseconcentrationsCurcumininducing,24hlater,groininvitroculture.Furthermore,itprovidedimportantbasisforthetreatmentofmalignanttumors(breastcancer,etc.)andthestudyformechanismofapoptosis. 【KEYCF7Cells,Apoptosis 姜黄素是从姜科植物的根茎姜黄(Curcumaaromatica,Salisb.)中提取的一
4、种植物多酚，具有抗炎、抗氧化、抗凝、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等药理作用，对多种肿瘤细胞系均有明显的凋亡诱导作用，是一种理想的细胞凋亡诱导物[1]，其抗癌范围很广，具有广阔的开发前景。 1材料与方法 1.1材料及仪器 MCF7细胞株由北京肿瘤研究所遗传室提供,本院实验中心细胞室传代、冻存;CCK8为上海同仁化学产品;RPMI1640培养基为美国Gibco公司产品;胎牛血清购自天津市川页生化制品有限公司;琼脂糖,100bpDNAmaker为北京六和同公司产品。其他均为国产分析纯试剂。美国SpectraMaxM2/M2e多功能微孔检测系统。 1.2方法 1.
5、2.1MCF7细胞培养复苏MCF7细胞于50mL培养瓶中,RPMI1640培养液(含100mL/L胎牛血清，100万U/L庆大霉素)37℃,50mL/LCO2培养,待细胞生长至对数生长期加入不同浓度姜黄素处理。 1.2.2CCK8法检测姜黄素对肿瘤细胞的抑制作用取对数生长期密度为2×105/mL的MCF7细胞，接种于96孔培养板上,100μL/孔。用培养液将姜黄素稀释成0.080，0.072，0.064，0.056，0.048μmol/L5个不同浓度，并分别加入96孔培养板(100μL/孔),每组设4个复孔，对照组加入等体积培养液，培养24h。实验终止前
6、4h每孔加入CCK820μL,10min后以酶标仪检测吸光度(A490值),按公式计算MCF7细胞抑制率。抑制率(%)=(1实验组平均A490值/对照组平均A490值)×100%。 1.3琼脂糖凝胶电泳分析取培养至对数生长期MCF7细胞(密度为1×106/mL)分别接种于6只50mL的培养瓶,1.5mL/瓶,实验组分别加入上述不同浓度的姜黄素悬液1.5mL,对照组加入1.5mL培养液。培养24h后,1500rpm/min离心,收集MCF7细胞,用PBS(0.01mol/LpH7.4)洗涤3次,最后1次移入1.5mLEP管中,加裂解液615μL，70℃水浴
7、振荡15min,重复2次,离心取上清液500μL加1000μL的无水乙醇使DNA析出,离心后用20μLTE缓冲液(pH7.4)溶解DNA。电泳前,用RNA酶(10g/L)消化30min。2%琼脂糖凝胶电泳60min,紫外透射仪观察并拍照。 2结果 2.1姜黄素对MCF7细胞增殖的抑制作用CCK8法检测0.048，0.056，0.064，0.072，0.080μmol/L5个不同浓度的姜黄素作用MCF7细胞24h，对MCF7细胞的生长有不同程度的抑制作用，并随着姜黄素浓度的增加，对MCF7细胞抑制率也增加，分别为17%、28%、48%、50%及55%
