cd15s和ecadherin表达与肝细胞癌侵袭转移相关性研究

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1、CD15s和Ecadherin表达与肝细胞癌侵袭转移相关性研究：李永庆尚培中苗建军肖颖丽张莹谷化平【摘要】目的：探讨CD15s和E钙黏蛋白(Ecadherin)在肝细胞癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移和患者预后的关系。方法：应用免疫组织化学方法，检测120例肝细胞癌组织中CD15s和Ecadherin蛋白表达，结合随访资料进行分析。结果：CD15s和Ecadherin在肝细胞癌中阳性表达率分别为39.2%和44.2%。CD15s阳性表达的肝细胞癌转移率高(P<0.05)，分化程度及患者5年生存率低(P<

2、0.05);Ecadherin阳性表达的肝细胞癌转移率低(P<0.05)，分化程度及患者5年生存率高(P<0.05)。CD15s表达与Ecadherin表达呈显著负相关(P<0.05)。结论：CD15s和Ecadherin表达与肝细胞癌转移和患者生存期密切相关，联合检测CD15s和Ecadherin蛋白表达可作为判断肝细胞癌预后有价值的参考指标。【关键词】癌/肝细胞;CD15s;E钙黏蛋白;肿瘤转移　　【ABSTRACT】Objective：Toinvestigatetherelationship

3、betetastasisofhepatocellularcarcinoma.Methods：Immunohistochemicalmethoda.Results：PositiveexpressionrateofCD15sandEcadherininhepatocellularcarcinomaaetastaticrate(P<0.05)andloaetastaticrate(P<0.05)andhighersurvivalratefor5years(P<0.05).TheexpressionofCD15s

4、a(P<0.05).Conclusion：Theseresultsshoetastasisandthesurvivalrateinhepatocellularcarcinoma.CD15sandEcadherinmightbeclinicallyusedasprognosticindicatorsinhepatocellularcarcinoma.　　【KEYa/Hepatocellular,CD15s,Ecadherin,Neoplasmmetastasis　　细胞与细胞或细胞与基质之间黏附特性的异常是恶性肿瘤细

5、胞重要的生物学特征之一，在侵袭和转移过程中发挥了重要作用。CD15s(sialylleplification，CSA)法，检测肝细胞癌组织中CD15s和Ecadherin蛋白表达状况，探讨它们之间的相关性，并结合临床随访资料，分析其表达与肝细胞癌侵袭转移和患者预后的关系。　　1资料与方法　　1.1一般资料199002—200805月解放军第251医院手术切除的原发性肝细胞癌标本120例，男性86例，女性34例;年龄26～72岁，平均(49.4±7.5)岁;肉眼形态:巨块型54例，结节型46例，弥漫型20例。肿瘤大小:≤

6、5cm41例，>5cm79例。按Edmondson分级标准Ⅰ～Ⅱ级为高分化癌48例，Ⅲ～Ⅳ级为低分化癌72例。伴有淋巴结、肝内、肝外转移者54例，无转移者66例。120例肝细胞癌患者中随访满5年者72例，其中死亡53例，存活19例。选取距癌灶2cm的癌旁肝组织20例和尸检正常肝组织10例作为对照。所有病例术前均未接受过放疗、化疗或免疫治疗。　　1.2方法手术标本均行常规HE染色，采用CSA法行免疫组化染色。小鼠抗人CD15s和Ecadherin单克隆抗体、生物素化酪胺盐(BT)和CSA试剂盒均为Dako公司(丹麦)产

7、品。标本经体积分数为10%甲醛固定24h，石蜡包埋、4μm厚连续切片。操作方法：①石蜡切片脱蜡至水,PBS洗;②放入3%H2O2处理,室温20min,PBS洗3min×3次;③分别滴加CD15s和Ecadherin一抗(1∶80),37℃温育1h,PBS洗3min×3次;④分别滴加生物素化抗鼠IgG(1∶300)37℃温育20min,PBS洗3min×3次;⑤第一次StreptavidinHRP(1∶500)37℃温育20min,PBS洗3min×3次;⑥BT(0.007mmolPL)37℃温育12min,PBS洗3mi

8、n×3次;⑦第二次StreptavidinHRP(1∶1000)37℃温育20min。PBS洗3min×3次;⑧0.05%DAB+3%H2O2显色,8～12min;⑨流水洗,苏木素衬染,蓝化,常规封片。实验用已知CD15s和Ecadherin阳性大肠癌组织作为阳性对照,PBS代替一抗作