p21，p27基因多态性对食管癌的发生及淋巴结转移的影响

《p21，p27基因多态性对食管癌的发生及淋巴结转移的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、p21，p27基因多态性对食管癌的发生及淋巴结转移的影响【摘要】目的：探讨p21基因外显子3′非翻译区（UTR)第20碱基对的核苷酸多态性(SNPs)以及p27基因第109密码子的SNP对食管鳞状细胞癌(ESCC)发生及淋巴结转移的影响.方法：采用聚合酶链反应（PCR）片段长度分析和PCR限制性片段长度多态性（RFLP）方法检测p21基因外显子的3′UTR第20碱基对SNP以及p27基因第109密码子SNP位点的基因型.结果：p21和p27的基因型分布在ESCC组及对照组中均符合HardygCl21.5mmol/L，dNTPs0.2mmo

2、l/L，上、下游引物各0.2μmol/L.p21PCR反应条件为：94℃预变性5min，94℃30s，64.8℃30s，72℃60s，共35个循环后，72℃延伸5min.p27PCR反应条件为：94℃预变性5min，94℃30s，58℃30s，72℃60s，共35个循环后，72℃延伸5min.取8μLPCR产物进行限制性内切酶消化，经30g/L琼脂糖凝胶电泳分析基因型.对p21，p27基因的PCR产物，分别经限制性内切酶PstI和BlgI37℃过夜消化.每一批PCR反应均以蒸馏水替代DNA作为阴性对照.100g/LDNA标本进行二次分型以证实分

3、型方法的可靠性.统计学处理：采用SPSS12.0软件包进行统计分析，基因型频率观察值和预期值采用HardyWeinberg平衡检验，病例组与对照组的基因型和等位基因型分布比较均采用χ2检验.以非条件Logistic回归法计算经性别和年龄校正的比值比（oddsratio，OR）及其95%的可信区间（confidenceinterval，CI）.P<0.05为差异具有统计学意义.2结果2.1患者一般特征ESCC组与对照组间的性别、年龄构成比差异均无统计学意义.吸烟者比例ESCC组与对照组相比差异无统计学意义（χ2=0.01，P=0.98）.

4、ESCC患者中UGIG家族史阳性者比例（26.2%）显著高于对照组（4.1%）（χ2=20.49，P=0.000）.经性别和年龄校正的OR值及其95%的CI为8.475（95%，CI=2.85～25）.有临床资料185例ESCC患者中，有淋巴结转移87例，无淋巴结转移98例，没有远处转移的病例.PCRRFLP检测结果显示，ESCC组与对照组p21，p27基因的多态性基因型与原始结果100%吻合.2.2p21，p27基因SNPs分布p21基因T/T基因型产物为133和735bp2个片段；C/C基因型产物为133，256和479bp3个片段；C/

5、T基因型产物为133，256，479和735bp4个片段（图1）.p27基因T/T基因型产物为76和378bp2个片段；G/G基因型产物为76，113和265bp3个片段；T/C基因型产物为76，113，265和378bp4个片段（图2）.p21的T，C等位基因频率和T/T，C/T，C/C基因型频率在ESCC组和对照组之间差异均无统计学意义（P>0.05，表1）.吸烟状况分层分析结果发现，p21的T/T基因型频率ESCC吸烟组（26.0%）显著高于健康吸烟组（12.0%）（χ2=8.60，P=0.014).经性别和年龄校正的OR值及其95

6、%的CI为3.36（95%，CI=1.45～7.75），而在非吸烟的患者和健康个体中，p21基因型及等位基因型频率差异均无统计学意义.p27等位基因型及基因型SNPs分布在ESCC组和对照组之间均无统计学差异.吸烟状况分层分析p27等位基因型及基因型SNPs分布在ESCC组和对照组之间均无统计学差异（表2）.2.3p21，p27基因SNPs分布与ESCC淋巴结转移的关系有淋巴结转移组p21的T/T基因型频率（26.4%）显著高于无淋巴结转移组（15.3%）（χ2=6.128，P=0.013）.经性别、年龄校正的OR值及其95%的CI为3.11（

7、95%,CI=1.28～7.52）.淋巴结转移状况分层分析结果显示,p27等位基因型及基因型SNPs分布在ESCC组与对照组之间差异均无统计学意义（表3）.表1p21，p27基因SNPs分布表2p21，p27基因SNPs分布与吸烟的分层分析表3p21，p27基因SNPs与淋巴结转移的关系周围浸润和淋巴结转移是影响UGIC患者预后和生存率的重要因素.因此，找到分子生物学指标来预测肿瘤浸润和转移，从而制定个体化的治疗方案具有重要价值.通过对ESCC患者淋巴结转移情况分层后发现与CC基因型相比，携带TT基因型可使ESCC患者淋巴结转移的危险性增高3倍

8、，携带TT+T/C基因型可使ESCC患者淋巴结转移的危险性增高近2倍，这表明携带TT或TT+T/C基因型的ESCC患者更容易发生淋巴结转移，提示携带该