曲古抑菌a对胆囊癌细胞增殖及对p21、survivin基因的影响

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1、温州医学院硕士学位论文曲古抑菌A对胆囊癌细胞增殖及对p21、survivin基因的影响姓名:苏龙丰申请学位级别:硕士专业:外科学指导教师:张启瑜2012-05-24温州医学院硕士毕业论文曲古抑菌素A诱导胆囊癌细胞GBC-SD凋亡的实验研究中文摘要目的:采用不同浓度TSA或不同时间的同浓度TSA作用于胆囊癌细胞GBC-SD,通过抑制率及细胞凋亡率来研究TSA对胆囊癌细胞GBC-SD的凋亡诱导作用。并通过不同浓度TSA作用GBC—SD细胞后P21及survivin的变化,探讨TSA诱导胆囊癌细胞GBC-SD凋亡与P21和survivin表达的关系,以及在TSA诱导胆囊癌细胞GBC-SD凋亡机制的

2、作用。方法:125一1000nmol/L范围内不同浓度的TSA及250nmol/LTSA不同时间点作用于体外培养的GBC—SD细胞,采用CCK-8法检测TSA对胆囊癌细胞GBC—SD增殖的抑制作用,流式细胞术AnnexinV—FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。应用相对定量RT-PCRp21基因、survivin基因的mRNA表达及Western—blot检测p21、survivin蛋白含量表达的变化。结果:CCK一8法检测显示TSA能有效抑锘IJGBC—SD细胞的增殖(P(0。05),且具有明显的时间和浓度依赖性。流式细胞术AnnexinV—FITC/PI双染法检测显示胆囊癌细胞GBC—S

3、D凋亡率随着TSA浓度的增加而增加。相对定量RT-PCR及Western-blot检测显示P21基因mRNA及蛋白含量随药物作用浓度增加而增高,Survivin基因mRNA及蛋白含量随药物作用浓度的增加而降低。结论:(1)TSA具有对胆囊癌细胞GBC—SD的增殖抑制作用,并具有时间浓度依赖性。(2)TSA具有对诱导胆囊癌细胞GBC—SD凋亡的作用,并具有浓度依赖性。(3)TSA诱导胆囊癌细胞GBC—SD凋亡的机制可能通过上调P21基因和下调Survivin基因有关。关键词:胆囊癌细胞:组蛋白乙酰化酶抑制剂;曲古抑菌素A(TSA):p21帆肛伸1;SIJrvjvin_4——温州医学院硕士毕业论

4、文TheEffectofTrichostatinAonTheProliferationandTheExpressionofP21andSurvivinGenesofGallbladderCellCarcinomaLineGBC.SDAbstractObjectiveTreatmentonhumangallbladdercancer∞llsGBC—SDbyusingdifferentconcentrationsofTSAanddifferenttimewithcertainconcentration,thispaperstudiesgallbladdercancercellsGBC—SDapo

5、ptosisinductionpathwaythroughtheinhibitionrateandapoptosisrate,whichprovideclinicalapplicationwiththeoreeticalbasis.ThenbytestingtheviariationofP21andsurvivingeffectedbydifferentTSAconcentration,thispaperexplorestherelationshipbetweeninducedTSAgallbladdercancercellsGBC—SDapoptosisandP21andsurvivine

6、xpression,todiscusstheroleofTSAintheapoptosismechanismsofgallbladdercancercellsGBC-SD.Methods:AfterhavingtreatedthehumanGBC.SDcellsinvitroculture24hoursbyusingdifferentconcentrationsTSAfrom125to1000nmol/Lrangeand250nmol/LTSAdifferenttimepoints.wedetectTSAgallbladdercancercellsGBC—SDproliferationinh

7、ibitionwithCCK.8assay,analyzethecellapoptosisratebyflowcytometryusingAnnexinV—FITC/PIapoptosisdetectionkit,measurethemRNAexpressionofp21andsurvivinbyrelativequantitativeRT.PCRandtheproteinexpressionofp21and

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