鳄鱼血蛋白酶解产物抗氧化特性和血管紧张素转化酶抑制活性研究

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1、４４《渔业现代化》２０１４年第４１卷第５期ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７⁃９５８０．２０１４．０５．０１０鳄鱼血蛋白酶解产物抗氧化特性和血管紧张素转化酶抑制活性研究１２１黄和平，陈孙福，罗永康（１中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京１０００８３；２广西盟展鳄鱼科技开发有限公司，广西南宁５３００２８）摘要：研究了鳄鱼血蛋白酶解产物的抗氧化特性和对血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）的抑制活性。利用木瓜蛋白酶酶解鳄鱼血浆蛋白和血球蛋白，用分光光度法测定了酶解产物的抗氧化能力和用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）测定其ＡＣＥ的抑制率。结果显示：

2、鳄鱼血浆和血球蛋白酶解产物的亚铁离子螯合能力差异性不显著（Ｐ＞０．０５）；在０～５ｍｇ／ｍＬ的浓度范围内，血球蛋白酶解产物清除ＡＢＴＳ自由基的能力大于血浆蛋白酶解产物，且在浓度为１ｍｇ／ｍＬ时，两者清除ＡＢＴＳ自由基的能力差异性极显著（Ｐ＜０．０１）；血浆蛋白酶解产物清除ＤＰＰＨ自由基的能力在０～５ｍｇ／ｍＬ的浓度范围内随着蛋白浓度的增加而升高，血球蛋白酶解产物在蛋白浓度为４ｍｇ／ｍＬ处达到最大清除率，之后下降；在０～２０ｍｇ／ｍＬ的浓度范围内，两种酶解产物的还原力随着蛋白浓度的提高显著升高，但两者还原力的差异性不显著（Ｐ＞０．０５）；鳄

3、鱼血浆和血球蛋白酶解产物对ＡＣＥ具有良好的抑制力，其最大抑制率可分别达到７５．５６％和８６．４２％。研究表明，鳄鱼血蛋白酶解产物在体外具有抗氧化和抑制ＡＣＥ的活性。关键词：鳄鱼血；酶解产物；抗氧化特性；ＡＣＥ抑制力中图分类号：Ｓ９８６．１文献标志码：Ａ文章编号：１００７⁃９５８０（２０１４）０５⁃０４４⁃０５［７］在许多国家，商业鳄鱼的人工养殖越来越多，能力；食物蛋白质水解后形成的小分子多肽具因此，鳄鱼血液的功能特性也随之成了当前研究有明显的降血压作用且无毒副作用。因此，从可的热点。研究表明，鳄鱼血和人血在许多方面存食资源中分离出的ＡＣＥ

4、抑制肽具有良好的应用［８⁃９］在差异，一个主要方面在于鳄鱼血红蛋白具有抗前景。［１⁃２］氧化的特性。抗氧化肽目前是国内外研究较研究发现，鳄鱼血具有抗菌、抗病毒、抗癌等［１０⁃１２］多的一种生物活性肽，具有抑制延缓脂质氧化、保功能，而关于鳄鱼血蛋白酶解产物的开发研护人体组织器官免受自由基侵害的作用，一些具究却很少有报道。本文运用木瓜蛋白酶将鳄鱼血有高效抗氧化活性的生物活性肽比天然抗氧化剂浆蛋白和血球蛋白进行酶解，并测定其酶解产物［３⁃４］更安全、更稳定、更高效。此外，酶解法制备的抗氧化和ＡＣＥ抑制能力，为鳄鱼血蛋白酶解的抗氧化多肽具有螯合金

5、属离子、捕捉自由基和产物功能的充分开发和利用提供理论依据。抗氧化作用，所以蛋白质及其酶解产物在功能食１材料与方法品的抗氧化活性方面可能比氨基酸有更好的功能［５⁃６］特性。将鳄鱼血蛋白酶解制备抗氧化多肽，１．１材料、试剂和仪器并作为功能食品的添加剂，可提高鳄鱼血的利用鳄鱼血浆和血球（广西盟展鳄鱼科技开发有价值。深入研究发现某些抗氧化肽还具有其他生限公司）；血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）、马尿酸、马物活性。如：某种蛋清活性多肽既具有抗氧化活尿酰⁃组胺酰⁃亮氨酸（ＨＨＬ）、ＤＰＰＨ（１，１⁃二苯基⁃性，又具有较强的血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）抑制收稿

6、日期：２０１４⁃０７⁃０２修回日期：２０１４⁃０９⁃３０基金项目：科技部星火计划引导项目“鳄鱼肉松加工技术集成与示范”（２０１４ＧＡ７９００１１）作者简介：黄和平（１９８８—），女，硕士研究生，研究方向：水产加工及贮藏。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｈｅｐｉｎｇ０８６０＠１６３．ｃｏｍ通信作者：罗永康（１９６４—），男，教授，博士，博士生导师，研究方向：水产品加工及贮藏。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｕｏｙｏｎｇｋａｎｇ＠２６３．ｎｅｔ《渔业现代化》２０１４年第４１卷第５期４５２⁃三硝基苯肼）、啡咯嗪（Ｓｉｇｍａ公司）；木瓜蛋白式中：Ｉ—ＡＢＴＳ自由基的清除

7、率，％；Ａ、样品，７３４酶（广西南宁庞博生物工程有限公司）；三氯化Ａ分别表示样品反应液和对照溶液在７３４ｎｍ对照，７３４铁、氯化亚铁、铁氰化钾、硫酸亚铁（国药集团化下的吸光度，Ａ。学试剂有限公司）；ＡＹ２２０型电子分析天平（日本１．２．４清除ＤＰＰＨ自由基能力的测定［１５］岛津公司）；ＬＣ３０００高效液相色谱仪（北京创新根据张尊听等的方法，并加以改进。将通恒有限公司）；ＤＳＨＺ⁃３００多用途恒温振荡器１．５０ｍＬ酶解产物溶解液与等量的９９．５％的乙醇（江苏太仓市实验设备厂）；ＵＮＩＣＯ⁃２７００分光光混匀，加入０．３７５ｍＬ的ＤＰＰＨ乙醇

8、溶液（０．０２％，度计（美国ＵＮＩＣ公司）；ＦＥ２０科特勒⁃托利多实ｗ／ｗ）震荡混匀，室温下暗室反应６０ｍｉｎ后在验室ｐＨ计（梅特勒⁃托利多仪器（上海）有限公５１７ｎｍ处测定其吸光度，吸光度越