纯培养和显微技术

《纯培养和显微技术》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第二章第二章纯培养和显微技术目的要求通过本章的课堂教学，介绍进行微生物学研究的基本技术，即无菌技术、纯种分离技术、培养技术和显微技术，了解微生物学的基本研究方法和研究手段，为后面学习其他微生物学相关知识打下基础。真钱游戏www.zk35.com微生物的基本特点：小！t在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性；t微生物的物种（菌株）一般也是以群体的形式进行繁衍、保存；培养技术在微生物学中具有重要意义！在研究中所使用的微生物培养群体：培养物：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体混合培养物：含有多种微生物的培养物；纯培养物

2、：只有一种微生物的培养物；通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果纯培养技术是进行微生物学研究的基础！微生物的基本特点：小！微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术，因为绝大多数微生物的个体形态及其内部结构只有通过显微镜才能进行观察和研究。第一节微生物的分离和纯培养从混杂的群体中分离特定的某一种微生物，是研究和利用微生物的第一步。一、无菌技术t用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物；t在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染；1、微生物培养的常用器具及其灭菌常用的器具：试管、瓶子、培养皿等1

3、、微生物培养的常用器具及其灭菌常用的器具：试管、瓶子、培养皿等常用的灭菌方法：高压蒸汽灭菌高温干热灭菌2、接种操作无菌操作：火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行二、用固体培养基分离纯培养液体培养基；培养基：固体培养基；琼脂半固体培养基；二、用固体培养基分离纯培养菌落（colony）：单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体众多菌落连成一片菌苔（lawn）二、用固体培养基分离纯培养使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法：稀释！二、用固体培

4、养基分离纯培养2、涂布平板法使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！1、稀释倒平板法操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好！二、用固体培养基分离纯培养3、平板划线法二、用固体培养基分离纯培养4、厌氧微生物的分离稀释摇管法三、用液体培养基分离纯培养稀释法进行液体分离必须在同一个稀释度的许多平行试管中，大多数（一般应超过95%）表现为不生长。例如：若同一稀释度的试管中有95%表现为不生长，则生长的试管中仅含一个细胞的几率为：4.8%；含二个细胞的几率为：0.12%；含三个细胞的几率为：0.002%0.048=0.9750.048+0.

5、0012+0.0002在有细菌生长的试管中得到纯培养的几率为97.5%四、单细胞（孢子）分离t一般采用显微操作仪，在显微镜下进行；t操作难度与细胞或个体的大小成反比；五、选择培养分离微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化：t抑制大多数其它微生物的生长；t使待分离的微生物生长更快；使待分离的微生物在群落中的数量上升，方便用稀释法对其进行纯化。（没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。）t使待分离的微生物生长““突出””；直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养。五、选择

6、培养分离1.利用选择平板进行直接分离t高温下培养：分离嗜热细菌；t培养基中不含N：分离固氮菌；t培养基加抗生素：分离抗性菌；待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制五、选择培养分离1.利用选择平板进行直接分离t牛奶平板：分离蛋白酶产生菌；t颜色反应：分离特定的菌株；t利用特定细菌的滑动特点进行分离纯化；待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物五、选择培养分离2.2.富集培养(参见P17)特定的环境条件仅适应于该条件的微生物旺盛生长待分离微生物在群落中的数量大大增加从自然界中分离到所需的特定微生物2.2.富集培养(参见P18

7、)富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微生物的需要。根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类；分离培养在特定环境中能生长的微生物；六、二元培养物培养物中只含有二种微生物，而且是有意识的保持二者之间的特定关系的培养物称为二元培养物。t病毒和宿主细胞；t纤毛虫、变形虫和粘细菌；获得微生物纯培养的方法比较方法特点应用固稀释菌落分离较为均匀,进行微生物计这3种方法可用于所体倒平数结果相对准确.但操作相对麻烦,有能在固体培养基培板热敏感菌有时易被烫死,而严

8、格好表面形成菌落的微养氧菌也可能因被固定在培养基中生生物的纯培养分离.基长受到影响并且,通过选用适当分涂布操作相对简单,是较常使用的常规的选择平板及培养离平板方法.但有时会因涂布不均匀使某条件,可直接分离各法些部位的菌落不能分开,进行微生种具有特定生理特物计数时