最新自身抗体的检测及应用课件PPT.ppt

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1、自身抗体的检测及应用一、自身免疫【概念】当机体免疫系统受某种因素作用使自身免疫耐受削弱或破坏时，免疫系统会对自身成份包括正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原产生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的这种现象称为自身免疫。一、自身免疫自身免疫可以是正常生理性的，例如：针对衰老或死亡的自体细胞。自身免疫也可以是病理性的，引起自身免疫病。三、自身抗体【概念】由各种原因造成的机体B细胞产生针对自身组织成分的抗体，称为自身抗体。自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志，每种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。RA自身抗体谱及临床意义RF60％RA中出现，量与RA

2、活动性及严重性呈正相关。亦在其它CTD出现抗CCP在50％RA中出现（抗环瓜氨酸肽抗体）特异性较高AKA（抗角蛋白抗体）在40％RA阳性APF（抗核周因子）在52％RA阳性抗RA33RA阳性率为35％抗Sa在部分RA阳性以上抗体阳性有助于早期RA及不典型RA的诊断和早期开展治疗，改善预后自身抗体与疾病的关系某些自身抗体对某种疾病的诊断具有高度特异性，已经成为该病的血清标记抗体或特异性抗体。某些自身抗体与疾病的活动性有相关性，少数自身抗体参与了免疫病病理性损伤。特异性较强的自身抗体抗Sm系统性红斑狼疮抗Scl-70系统性硬化症抗SSA/SSB干燥综合征抗CCP类风湿关节炎

3、抗体滴度的高低可判断疾病的活动性抗双链DNASLEaCLSLE、磷脂抗体综合征RF类风湿关节炎预测疾病的预后及临床亚型抗Jo-1皮肌炎合并肺间质病变抗Scl-70弥漫性系统性硬化抗rRNP狼疮脑病自身抗体的意义自身免疫性疾病的诊断；疾病活动性的判断；疗效的观察及预后；指导临床用药等；进行不同疾病的鉴别诊断。自身抗体常用检测方法自身抗体的检测方法：（1）酶联免疫吸附测定法（ELISA）：该法检测自身抗体快速、敏感及特异性高，但对抗原的要求很高，必须使用高质量的纯化抗原，由于一种抗原只能检测一种抗体，多种抗体的检测就必须多种单独的抗原，因此该法在临床免疫实验室的应用受到一定

4、限制。（2）酶免疫斑点(条带)实验【优点】将经亲和层析纯化的抗原包被在固定的位置，每一种抗原只对应一条条带，不会产生非特异性反应条带，结果灵敏度高、特异好，判断实验结果简单，每个反应区均有质控带，可以显示操作是正确，阴性与阳性的结果明显，容易判断，条带显色与抗体滴度相关。(3)间接免疫荧光法(IFT):检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性。间接免疫荧光法原理将稀释的血清与生物载片（反应区内固定有包被基质的生物薄片）温育，如果样本是阳性的，特异性IgG、IgA和IgM抗体与相应的核抗原结合。在第二次温育时，荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应，形成荧光

5、显微镜下所观察到的特异性荧光模式。抗核抗体(ANA)是以自身真核细胞成分作为靶抗原的一组自身抗体的总称，泛指各种核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。抗核抗体(ANA)均质型与AHA（抗组蛋白抗体）、抗DNA有关，引起LE形成主要见于SLE、药物性狼疮核膜型与抗ds-DNA有关，多见于SLE，特别是有肾炎者抗核抗体(ANA)斑点型与抗ENA有关，应进一步查特异性抗体核仁型多见于系统性硬皮病项目检验方法SLE四项ANA间接免疫荧光抗DS－DNA抗体间接免疫荧光抗组蛋白抗体ELISA抗核小体抗体ELISAENA系列抗RNP免疫印迹、ELISA抗SM免疫印迹、ELISA抗S

6、SA免疫印迹、ELISA抗SSB免疫印迹、ELISA抗JO-1免疫印迹、ELISA抗SCL-70免疫印迹、ELISA抗核糖体P蛋白免疫印迹、ELISARA三项AKA（抗角质蛋白抗体）间接免疫荧光抗RA33ELISA抗CCP（抗环瓜氨酸肽抗体）ELISAANCA四项P-ANCA（荧光模型为核周模型）间接免疫荧光C-ANCA（荧光模型为细胞质模型）间接免疫荧光MPO-ANCA（髓过氧化酶抗体）ELISAPR3-ANCA（抗蛋白酶3抗体）ELISA常见的自身抗体及其检测方法(1)(2)自身免疫肝炎七项检验方法ANA间接免疫荧光抗LMA抗（肝细胞膜抗体）间接免疫荧光ASMA（抗

7、平滑肌抗体）间接免疫荧光抗LKM（抗肝肾微粒体抗体）间接免疫荧光抗SLA（抗可溶性肝抗原抗体）间接免疫荧光AMA（线粒体抗体）间接免疫荧光抗LSP（抗肝脏特异性蛋白抗体）间接免疫荧光RF三项RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂综合征三项（ASP）ELISAPT-IgG（凝血素抗体）ELISAPT-IgMELISA抗β2-糖蛋白1抗体ELISA常见的自身抗体及其检测方法ds-DNA判断疾病活动性---ELISA诊断疾病-----IFT自身抗体检测结果正确解读检测方法局限性：假阳性，假阴性临床意义局限性：非