最新PCR测定临床应用及结果临床意义教学讲义PPT.ppt

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1、PCR测定临床应用及结果临床意义概述临床PCR检测三条件•SDA批准使用的试剂盒•国家批准符合要求的实验室•经行政部门同意并培训后持证上岗关于结核杆菌等5项检测的具体应用注意事项•标本处理：痰液化，抑制物去除•试剂质控及灵敏度临床评价•结核的PCR临床主要应用a.结核与其他分枝杆菌区分b.结核耐药基因c.对含菌量低的标本的分离d.为临床可疑者捕捉信息•PCR方法与痰涂片及TB培养的比较应做比对研究临床评价沙眼衣原体(Ct)实验设计特点靶及引物选择•外膜蛋白基因(MOMP-OMPI)•7.5kb质粒隐蔽性基因质粒拷贝•16srRNA基因注意事项标本取材是关键临床评价•细胞培

2、养McCoy.Hela-229金标准•ELA法•PCR法.专家希望此法为新金标HBV-DNA.实验设计特点•S及C混合引物•定量用治疗监测104,106临床评价一般临床靠免疫标志但无法明确时可测拉米呋定及干扰素治疗监测新问题研究HCV-RNA实验室设计特点•需扩增二次•低温启动UDG系统--RNA不稳定性注意事项防止RNase污染杜绝溶血临床评估•定性用于诊断(只有抗HCV无法决定病毒存在状况）•定量用于治疗监测HLA方法:免疫学分子生物学：PCRSSCPRFLP基因芯片I类(A,B,C)与疾病发生频率有关II类(DR,DQ,DP)等移植配型DR为例设计10条特异性引物:

3、DR1-DR10设计2条组特异性引物:3568,DRB1选择其中某些组合成上,下游引物据bp数推算等位基因局限性:DR6用排它法有6种表型(DR3/DR3,DR8/DR6等)不能区分临床评价中共同问题假阳:残余模板的污染其它假阴:标本处理不当其它假阳性与假阴性不能单向强调PCR的优势和检出率应与传统方法比对,合理判断阳性率与“金标准”临床实践是检验实验室工作的标准重视从临床实践找出问题和评价临床实践是判断PCR结果最重要的依据Theend聋人文化河北大学两种划分旧的划分是把人分为健全人和残疾人。残疾人又分为聋人盲人肢残人。把聋人盲人和肢残人并列了。新的划分把人划分为健全人

4、和肢残人。健全人又划分为聋人和健听人。这是独立立场自主眼光。不同于旧的划分，把聋人健全人，体现了文明进步，思想的发展。具有重要意义。旧的划分把聋人视为残疾人，已不为大众所接受。古希腊柏拉图等辈将聋人看残了，看愚了，其遗留影响至今尚未肃清。我们同柏拉图等辈的斗争是两条哲学路线的斗争。两条哲学路线斗争的焦点就是“两种划分”。我们同欺聋派有着根本立场的不同。我们的立场是（1）聋人是智力健全人格正常的健全人。（2）残疾人就是肢残人，肢残人就是残疾人。两条哲学路线的斗争在近代民族解放运动领域有表现。古希腊哲学的几个派别护聋派e聋派欺聋派实际上，古希腊哲学家都迫于威胁压力，未能明辨，

5、以为的的聋人哲学是全新的学问。例如柏拉图，他，他就意欺聋。聋人的自治自强应该表现出一个自我实现的社会存在，丰富而且又韧性。我文化聋人与天不老，我聋人文化与国无疆。这岂是柏拉图等辈所能理解的？聋人哲学社会科学聋人哲学是独创体系，是完整的世界体系。是古希腊哲学的指导，能完整囊括西方哲学。聋人社会科学也能涵盖中国社会科学。聋人百科全书是能与四库全书并列的知识体系，聋人哲学社会科学是独创的知识体系，是科学的世界观和方法论。