最新KRAS和EGFR检测与临床应用教学讲义PPT.ppt

《最新KRAS和EGFR检测与临床应用教学讲义PPT.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、KRAS和EGFR检测与临床应用汇报内容KRAS和EGFR的简介及临床意义ARMS-PCR的基本原理和技术特点等位特异性引物设计KRAS试剂盒开发简介KRAS和EGFR的简介及临床意义KRAS基因突变影响非小细胞肺癌药物疗效KRAS基因野生型的非小细胞肺癌患者能从小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI，如吉非替尼、厄洛替尼）治疗中获益，而基因突变的患者易发生抵抗；KRAS突变型患者使用厄洛替尼联合化疗后，其无症状生存期和总生存期明显低于野生型患者（图中红线所示）AndersonSM,2011,ExpertRev.Mol.DiagnEberhardDA,2005,JClinOnco

2、l非小细胞肺癌患者检测KRAS突变相关指南美国国立综合癌症网络（NCCN，2009）指出，KRAS突变与非小细胞肺癌患者TKI抵抗有关，KRAS基因测序有助于确定哪些病人适合TKI治疗。当KRAS基因发生了突变，则不建议病人使用厄洛替尼进行分子靶向治疗。KRAS主要突变位点在结直肠癌中，KRAS突变主要发生于codon12(80%)、codon13(15-20%)、codon61和146(<5%)；在肺癌中，约97%的KRAS突变发生于codon12、13，其余位于codon61和146。突变密码子碱基变化CosmicIDGly12Asp12GGT＞GAT521Gly12

3、Val12GGT＞GTT520Gly12Ser12GGT＞AGT517Gly12Cys12GGT＞TGT516Gly12Ala12GGT＞GCT522Gly12Arg12GGT＞CGT518Gly13Asp13GGC＞GAC532EGFR突变背景EGFR基因位于染色体7p11.2，大小约200kb，是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号传导的受体。EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相关信号通路中关键因子的活性或细胞定位异常，与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。非小细胞肺癌中EGFR突变率在北美和西欧为10%左右，而在东亚为30-50%。其中在

4、亚洲、女性、非吸烟、腺癌患者中EGFR突变率最高，达70-80%。EGFR突变背景研究发现EGFR突变与吉非替尼、厄洛替尼的疗效密切有关。其中EGFR突变的患者对吉非替尼、厄洛替尼治疗敏感，有效率在80%以上；而EGFR野生型的患者的有效率在10%以下。吉非替尼、厄洛替尼作为一线药物治疗非小细胞肺癌，相比传统的化疗可以取得更长的无进展生存期（PFS），且副作用相对较小，患者容易耐受，但总体生存期（OS）并未延长。EGFR-TKI目前主要用于非小细胞肺癌一线、二线和维持治疗。我国大部分医生将其用于二线（69.4%）治疗，41.7%的医生将其用于一线治疗，27.8%的医生将其

5、作为维持治疗药物。EGFR突变影响肺癌药物疗效研究表明EGFR突变型患者使用吉非替尼的疗效要优于卡铂与紫杉醇组合治疗，而在野生型患者中则相反，使用吉非替尼的疗效不如卡铂与紫杉醇组合治疗。MokT.S.2009,NEngJMedMaemondoM.2010,NEngJMedEGFR突变检测相关指南美国国家综合癌症网络(NCCN)2011版的癌症治疗指南中明确指出：EGFR突变，尤其是外显子19的缺失突变和外显子21的L858R突变，与肿瘤对TKIs如吉非替尼治疗敏感性有重要关系。而部分EGFR-TKI初始治疗有效的患者后期会发生耐药，与EGFR外显子20突变密切相关。美国临

6、床肿瘤学会（ASCO）在JCO上发表报告：EGFR-TKI是携带EGFR突变型的非小细胞肺癌病人的一线治疗药物，有益于进展期非小细胞肺癌患者的个体化治疗。欧洲EMEA指出：易瑞沙（吉非替尼）仅对携带EGFR突变型的非小细胞肺癌患者有效，平均无进展生存期延长3.5月。美国FDA（2013）批准对拟采用阿法替尼、厄洛替尼等EGFR-TKI治疗的患者进行EGFR突变检测的试剂盒（therascreenEGFRRGQPCRKit和cobas®EGFRMutationTest）；我国《非小细胞肺癌临床实践指南》中也明确指出EGFR突变，尤其是19号外显子缺失突变与肿瘤对酪氨酸激酶抑

7、制剂(TKIs)的敏感度有重要关系；对腺癌、大细胞癌、非小细胞肺癌等肺癌组织学类型，EGFR检测为一类推荐。EGFR突变位点（常规检测29个）突变外显子碱基变化CosmicIDG719A182156G>C6239G719S182155G>A6252G719C182155G>T6253E746-A750del(1)192235-2249del156223E746-A750del(2)192236-2250del156225L747-P753>S192240-2257del1812370E746-A750>I192235-2252