RNA纯度讲解学习.doc

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1、…………………………………………………………最新精品资料推荐……………………………………………………280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。A230测定其它碳源物质，如酚，糖类等；A260是核酸的吸收峰测RNA和DNA，引物等的浓度用的；A280是蛋白质的吸收峰。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）——1.8~2.0时，我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的，不过要注意，当用Tris作为缓冲液检测吸光度时，R值可能会大于2（一般应该是<2.2的）。当R<1.8时，溶液中蛋白或者其他有机物的

2、污染比较明显，你可以根据自己的需要决定这份RNA的命运。当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。纯RNA的A260/A280的比值为2.0。OD260/OD230的比值还表明RNA的纯度——其值<2.0表明裂解液中有亚硫氰胍和β-巰基乙醇残留，其值 >2.4，需用乙酸盐，乙醇沉淀RNA。附：260/230的值，一般不要小于2.0，小的话表明有异硫氰酸胍，β-巯基乙醇或乙醇的残留。补救的方法是再沉淀一次，然后重复乙醇洗涤的过程。但从我的经验看，后面RNA丢得很多……因此提RNA时就注意了 个人经验，260/230偏小的话，提取时可以改进以下几点： 1.加氯仿抽提后取少一点上清，不要贪

3、多。 2.加乙醇洗的时候，多晃几次，尽量让RNA沉淀整片悬浮起来（有时候确实浮不起来也没办法。） 3.弃乙醇的时候，用枪吸而不是倾倒，倒的话经常有液滴留在管壁上，倒不干净。第一次用蓝枪头吸，可以不完全吸干，免得吸到沉淀；然后短暂离心把残余酒精甩到管底，看准了用白枪头尽量吸干净。RNA量大，被白枪头弄掉一点也没关系。 4.溶解前晾干的时间可以长一点，5分钟也没关系的。标准的做法说是不能晾太久，等沉淀开始变透明就要加水溶解，但是我晾过10分钟的，后面RNA量也很大。可能量大，虽然有些溶解不了，最后浓度还是高。 可能不完全正确，但是以前我出现过260/230偏小的问题，按上面方法改进了操作，后

4、面就好了。 还有一种原因可能是多糖类杂质残留，可试试用LiCl沉淀。RNA溶液的OD260/230的比值在0.2左右，参考资料显示这个比值应该在2.0附近。我觉得你可能根本没有提出rna，按理说有蛋白污染之类的话也不会如此之低。…………………………………………………………最新精品资料推荐……………………………………………………3…………………………………………………………最新精品资料推荐……………………………………………………光伏发电项目施工组织设计第一章、编制说明第一节、编制目的本施工组织设计是光伏发电项目第一阶段提供较为完整的纲领性文件，我们将依据设计图纸和现场施工条件编制可操作的施

5、工组织设计，以其用来指导工程施工与管理，确保优质、高效、安全文明地完成工程施工任务。第二节、编制说明1、本项目位于山东聊城，不管在经济和文化上都有着自己深厚的基础和强劲的发展势头，各项基础设施已日臻完善。拟建的光伏发电项目将改善城市及当地环境，提高城市品位将起到重要的作用。2、严格按照国家及地方管理的有关规定，对施工现场进行管理，建立人员档案制度。3、严格按照国家质量标准和有关规定组织施工，实施本项目的质量体系工作。4、针对本工程的特点，结合、在工程建设施工中所积累的实践经验和在以往同类型工程施工成功经验，本着实事求是的科学态度，编制本工程的施工组织设计。第三节、编制依据：1、依据该项目设

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