细胞蛋白水平与mRNA丰度间的依赖关系.docx

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1、细胞蛋白水平与mRNA丰度间的依赖关系近20年来，高通量技术的发展支持了大规模的基因组、转录组和蛋白质组定量分析。这些数据被用来分析在不同系统和条件下转录组与蛋白质组的定量关系。这些研究有时候会导致一些冲突的结论，尤其是究竟在何种程度上mRNA的量控制了蛋白质的量。基础生命科学研究和转化生命科学研究的一个核心问题是：基因组信息是如何通过自身的表达来决定表型的。中心法则将DNA、RNA和蛋白质这三种分子紧紧联系在了一起。来源于同一基因座的转录本的量与蛋白的量之间的关系并不简单。蛋白的表达水平除了被转录本的量调控以外，还存在其他许多重要的调控途径。这些途径包括(1)翻译率：翻译率

2、受到mRNA序列的显著影响，比如上游的开放阅读框，内部的核糖体结合位点；(2)翻译率的调控：调控的方式有蛋白结合到转录本上的调控原件，非编码RNA的结合，转录本与核糖体的结合能力；(3)蛋白质的半衰期：泛素化途径的降解或者细胞自噬不依赖于转录本的量；(4)蛋白质合成的延迟：蛋白合成需要时间，因此转录的改变需要在一个短暂的延迟后才能影响蛋白的水平；(5)蛋白的转运：蛋白在空间上被转运出了它所合成的地方。因此直接比较蛋白的丰度与mRNA的丰度是不可取的。蛋白与mRNA的相互比较有两种不同的形式。一种是(Figure1A)在不同的个体、条件或者时间点，比较来源于同一个基因的蛋白与m

3、RNA的量，这样做是为了研究mRNA水平的变化在何种程度上影响了蛋白量的变化。另一种(Figure1B)是比较多个不同的蛋白和与之对应的mRNA的量，这样做是为了研究在何种程度上蛋白水平能反应mRNA的不同。Figure1.不同形式的蛋白与mRNA相互比较YLiu，ABeyer，RAebersold.OntheDependencyofCellularProteinLevelsonmRNAAbundance.Cell.技术的进步加深了我们对mRNA与蛋白水平关系的理解。基因组层面的研究需要高精度、高灵敏度和高准确度的技术(Figure2)。Figure2.控制基因表达的一系列机

4、制和与之相应的定量手段YLiu，ABeyer，RAebersold.OntheDependencyofCellularProteinLevelsonmRNAAbundance.Cell.过去20年来，质谱技术已经成为研究蛋白定性和定量的重要方法。作为一种全面的工具，质谱支持大规模的相对和绝对定量，而且不需要抗体(Table1)。Table1质谱技术总结和用其研究mRNA与蛋白质关系的代表性文献YLiu，ABeyer，RAebersold.OntheDependencyofCellularProteinLevelsonmRNAAbundance.Cell.在稳定状态的时候，mR

5、NA的水平决定了蛋白质的水平，而且蛋白质的合成会有延迟(Figures3Aand3B)。很难严格地定义“稳定的状态”，姑且认为我们通常做组学实验时收集的细胞，如果在某个时间段内(通常几小时)的蛋白或者mRNA水平保持相对恒定，则被看做是“稳定的状态”。在短暂的适应期，转录后的调控非常重要。如果改变细胞的生存环境和条件，细胞需要短暂的适应期。这时如果仅仅只改变转录水平则太慢了，因此就需要转录后的调控机制。提高现有转录本的翻译速率能快速地合成新的所需蛋白，同时目标性地降解蛋白质，例如通过泛素途径，可以加速清除无用蛋白甚至毒性蛋白(Figures3B–3D)。按需表达的机制可以保证

6、在信号刺激时细胞快速地响应合成所需蛋白，而不是组成型地表达蛋白(Figures3B)。另一方面，众所周知，翻译后修饰(也可以认为是一种转录后调控)在短暂适应期也非常重要。由于能量和浓度的限制，细胞内蛋白的合成和降解是平衡的。蛋白合成受到多方面的限制。一方面是能量和营养；另一方面是催化蛋白合成的调节机制。合成蛋白的代价要比合成mRNA的代价大得多，因此细胞要选择最经济的办法来解决蛋白合成的问题。尽管处在各种限制下，细胞都努力使蛋白保持在恒定水平，无论稳态还是动态环境。这种物理的限制可以被用来优化蛋白的扩散速度、蛋白在细胞器间的转运和生化反应速率(Figures3E–3G)。在细

7、胞内，蛋白的拷贝数比mRNA的拷贝数多得多。一项研究表明，裂殖酵母在增殖期转换到平衡期时，mRNA的拷贝数减少了将近70%，而蛋白拷贝数只减少了9.5%。Figures3mRNA与蛋白质动态关系的重要性YLiu，ABeyer，RAebersold.OntheDependencyofCellularProteinLevelsonmRNAAbundance.Cell.蛋白质的合成需要细胞分配资源，这种分配由转录调控开始。细胞生产一种蛋白的代价主要由蛋白的前体，蛋白的组成(比如分子量)和蛋白合成速率决定。研究