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1、概述定义：免疫学技术是根据抗原抗体特异性结合原理建立的各种检测、分析技术的总称分类：体外免疫检测技术：常以免疫血清作为抗体的来源，故又称为血清学试验细胞免疫技术：用于检测和研究集体的细胞免疫功能与状态免疫制备技术：如抗体制备、纯化、标记技术等血清学试验类型凝聚性试验：凝集试验，沉淀试验标记抗体技术：荧光、酶、放射性同位素标记技术等有补体参与的试验：补体结合试验等中和试验：病毒中和试验等免疫转印技术免疫传感器技术血清学反应的一般特点特异性与交叉性:抗原抗体结合的特异性是抗原分析和疾病诊断的基础；但不同微生物的部分共同抗原或不同抗原的相同表位可出现交叉反应，后
2、者是区分血清型或亚型重要依据结合比例:抗原抗体结合在比例适当时才出现明显可见反应,抗原或抗体过多可抑制可见反应,称为带现象可逆性:抗原抗体结合力与非共价键性质、数量和距离有关,形成的复合物可以解离,离解常数(K)反映抗体与抗原之间的亲合力,高亲合力结合不易解离反应的阶段性:特异结合迅速(几秒-几分钟),可见反应阶段较长在凝集试验（颗粒性抗原）中，常因抗体过剩出现前带现象，故需固定抗原稀释抗体；而在沉淀试验（可溶性抗原）中，可因抗原过剩出现后带现象，故需稀释抗原影响血清学反应的因素抗体:包括抗体动物来源、浓度(效价)、亲和性等抗原:包括理化特性(可溶性，颗粒
3、性)和抗原表位数目及种类电解质:无电解质存在不出现可见反应(沉淀或凝集),一般用生理盐水作为抗体和抗原稀释液,有时需特殊电解质,但盐浓度过高会出现非特异性蛋白沉淀(盐析)酸碱度:反应一般在pH6-9范围内进行温度:一般在37℃或室温进行,较低温度(如4℃)出现可见反应慢,但特异性强,温度过高会使已结合复合物解离时间:出现可见反应需要一定时间,应在一定时间内观察结果或终止反应血清学试验的优点特异性强，敏感性高检测样品用量少，预处理较简单试验方法多，可择优选用方法简易、快速可用于抗原或抗体的定性、定量、定位检测血清学试验的应用抗原抗体定性检测:疾病诊断血型鉴定
4、病原微生物分型鉴定抗原抗体的定量检测:抗原或抗体效价测定免疫效果跟踪检测流行病学调查其它生物活性物质定量分析抗原定位检测:借助光学和电子显微镜,在细胞和亚细胞水平研究病原微生物及其表达产物与宿主细胞的关系凝聚性试验定义：抗原与相应抗体结合形成复合物，在电解质存在下相互凝聚成肉眼可见的凝聚物或沉淀物分类凝集试验：细菌、红细胞等颗粒性抗原或与颗粒性载体（红细胞、乳胶等）结合的可溶性抗原与相应抗体结合，在电解质参与下形成肉眼可见的凝集团块沉淀试验：可溶性抗原与相应抗体结合，在电解质参与下形成肉眼可见的沉淀物凝集试验分类凝集性试验直接凝集性试验间接凝集性试验玻片凝
5、集性试验试管凝集性试验生长凝集性试验正向间接凝集性试验反向间接凝集性试验协同凝集性试验间接凝集抑制试验抗球蛋白试验直接法间接法玻片凝集试验属于直接凝集和定性试验可用于未知(待测)抗原或抗体检测快速简便，1-3分钟内观察结果，出现凝集颗粒为阳性反应主要用于细菌分型鉴定、疾病诊断（如布氏杆菌和鸡白痢检疫)和血型鉴定已知抗原阳性抗体对照阴性抗体对照待测抗体(阳性)待测抗体(阴性)试管凝集试验多用已知抗原进行血清抗体的定性和定量（效价或滴度）检测，可用于疾病诊断和流行病学调查常用生理盐水将待测血清作倍比稀释，与等量抗原混合，反应温度和时间视抗原种类决定判断标准:+
6、+++(100%凝集),+++(75%凝集),++(50%凝集),+(25%凝集),-(不凝集),出现50%以上凝集的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价(滴度)注意阳性和阴性对照,适当稀释待检血清以避免前带现象，有些细菌（如R型细菌）悬液不稳定，易出现自凝现象根据凝集反应原理可制备单因子血清间接凝集试验定义：将可溶性抗原或抗体吸附在免疫无关的颗粒载体上，然后与相应抗体或抗原进行的凝集反应常用载体：红血球(间接血凝试验)和乳胶(乳胶凝集试验)等，将可溶性抗原吸附在颗粒载体表面的过程称为致敏分类：正向间接凝集试验：将抗原吸附载体检测抗体反向间接凝集试验：将抗体吸
7、附载体检测抗原一般在微量反应板上进行可用于抗原或抗体的效价测定，具有简单、方便和较准确等优点协同凝集试验葡萄球菌A蛋白(SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白质SPA能与人和动物(猪、犬、兔、猴、豚鼠)IgGFc片段非特异结合与抗体结合的SPA菌体称为致敏菌体,可与抗原(细菌、病毒、毒素等)发生快速凝集,称为协同凝集试验主要用于传染病的快速诊断,SPA菌体还可用于IgG纯化葡萄球菌抗体抗原抗球蛋白(Coombs)试验本质：间接凝集试验原理：不完全抗体(单价抗体)与颗粒抗原结合不出现可见凝集反应，用单价抗体免疫动物,将获得的抗抗体与结合有单价抗体的
8、颗粒载体混合，出现可见的凝集反应应用：初生动物自身免疫溶血性贫血诊
