微生物的实验室培养课件.ppt

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1、专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养基础知识（一）培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质称培养基1.培养基的种类液体培养基（一般用锥形瓶盛装）。固体培养基（一般用试管或培养皿盛装），在液体培养基的基础上再添加琼脂。最早进行微生物培养的科学家是：巴斯德液体培养基固体培养基：菌落培养基的基本成分一般都含有碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）、无机盐和水等。其他条件pH、特殊营养物质（如维生素等）、氧气的需求等。（二）无菌技术无菌操作泛指在获得纯净培

2、养物的关键是无菌技术就是对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行__________将培养皿、接种用具进行_________接种的过程要在_________附近进行。实验后对培养基等也要_______处理防止外来杂菌的入侵防止杂菌污染的操作技术。培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法技术。包括清洁消毒灭菌酒精灯灭菌消毒无菌技术的种类灭菌使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀死部分对人体有害的微生物。使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。常用的消毒方法煮沸消毒法巴氏消毒法酒

3、精擦拭双手氯气消毒水源紫外线或化学药品（石碳酸或煤酚皂溶液）消毒不包括芽孢和孢子不耐高温的70-75度30分钟或80度15分钟先用消毒液，再用紫外线，消毒液即可加强紫外线的消毒效果1.灼烧灭菌：常用的灭菌方法2.干热灭菌：3.高压蒸汽灭菌：接种用具和接种过程中的_______或______放在酒精灯火焰的___________中进行灼烧灭菌。将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并需要保持干燥的物品放到干热灭菌箱内，在___________中加热________即可。将需灭菌的物品放到盛有水的高压灭菌锅内__

4、____，待______排尽后，密闭继续加热至锅内压力到______，温度到______后，维持15～30min即可。试管口瓶口充分燃烧层160～170OC1～2h煮沸冷空气100kPa121OC实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方物质牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水重量5g10g5g20g定溶至1000mL2.称量按比例称取各种物质，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易______，称取时动作要_______，称后________________。吸潮迅

5、速及时盖上瓶盖先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，最后加入琼脂，搅拌，待溶解后，加自来水定溶至1000mL。将配制好的培养基放到锥形瓶中，瓶口加棉塞，包上牛皮纸，连同培养皿（5～8套，用几层报纸包好）一起放到高压锅内灭菌。待培养基冷却到__________左右时，在___________________倒平板50OC酒精灯火焰附近3.溶化4.灭菌5.倒平板讨论1.培养基灭菌后要冷却到50OC时倒平板

6、。用什么办法来估计培养基的温度？用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可开始倒平板。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过__________，防止瓶口的_______污染培养基。灼烧灭菌微生物3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结______，凝固后的培养基表面的_____也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分__________，又可以防止皿盖上的水珠____________，造成污染。4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还

7、能用来培养微生物吗？为什么？_______________可能在_______________的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。空气中的微生物皿盖与皿底之间水珠湿度更好地挥发落入培养基（二）纯化大肠杆菌微生物接种方法常见的有_____________________1.平板划线法通过_______在琼脂固体培养基表面___________的操作，将____________逐步稀释分散到培养基的表面在数次划线后可以分离到由__________繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称_______

8、。平板划线法稀释涂布平板法聚集的菌种接种环连续划线菌落一个细胞1.为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环？操作的第一步灼烧接种环是为了____每次划线前灼烧接种环是为了杀死____划线结束后仍然要灼烧接种环，能____讨论避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；上次划线结束后，接种环上残留的菌种。及时杀死接种环上残留的菌种，避免____________和___________细菌污染环境感染操作者2.在灼烧接