日粮不同能理水平对乌金猪肌内脂肪沉积相关基因表达的影响.pdf

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1、2O14茸第5《=)卷第t5糍Nutrition；dF啦d8ruffs·瀚黼日粮不同能量水平对乌金猪肌内脂肪沉积相关基因表达的影响李永能，杨明华，毕保良，孔令富3匿三，赵素梅，苏-7--~，黄英(1．云南农业大学招生就业处，云南昆明650201；2．云南农业大学，云南省动物营养与饲料重点实验室，云南昆明650201；3．云南农业大学，动物科学技术学院，云南昆明650201；4．大理学院农学与生物科学学院，云南大理671003)摘要：本试验旨在研究日粮能量水平对鸟金猪不同生长阶段肌内脂肪沉积候选基因表达水平的影响。选取体重约15kg的乌金猪54头，随机

2、分成3组，每组3个重复，每个重复6头，在15N30、30～60、60-100kg体重阶段分别饲喂不同能量水平日粮，日粮水平为低能量水平(消化能l1．84MJ／kg)、中能量水平(消化能12．97MJ／kg)和高能量水平(消化能14．18MJ／kg)，在体重3O、60、100kg时分批屠宰取背最长肌测定肌内脂肪含量，通过Rea1一timePCR检测肌内脂肪沉积候选基因mRNA表达水平。结果表明：高能量组乌金猪背最长肌肌内脂肪含量显著高于中、低能量组(P

3、因的表达水平显著高于中、低能量组(P

4、、母各半，取背最长肌。一部工的主要原料。肌内脂肪(intramuscularfat，IMF)含分背最长肌于一80℃保存，用于测定基因表达水平。量是影响肉质性状的主要因素【3]，肌内脂肪增加可一部分背最长肌用于肌内脂肪含量测定。以提高肉的嫩度和风味，改善肉品质。因此，本研究1．2试验日粮参照中国肉脂型生长肥育猪饲养以中国肉脂型生长肥育猪饲养标准[4]为基础，设计标准【3]，根据试验猪各生长阶段营养需要配制不同不同的能量水平日粮，通过对肌内脂肪含量及肌内阶段的日粮。设立3个不同的能量日粮水平，以中国脂肪沉积候选基因表达水平的综合分析，阐明日粮地方猪饲养水

5、平能量需求为中值(中能量组为能量水平对乌金猪肌内脂肪沉积的营养调控机理，12．97MJ／kg)，在此水平上、下各设1个能量水平，即高为提高我省地方猪种肉品质提供一定的理论依据。能量水平为14．18Mj／kg、低能量水平为11．84MJ／kg，日粮氨基酸、蛋白质、微量元素等水平固定。日粮能1材料与方法量水平及饲料配方见表1、表2。1．3肌内脂肪含量测定试验猪体重分别达到30、1．1实验动物及分组选取健康、胎次相近、体重60、100kg左右时在屠宰场电击后进行屠宰，每组屠为15kg左右的乌金猪54头，公、母各半，随机分成3宰6头，公、母各半，屠宰前禁饲2

6、4h，宰杀后1h内取组，每组18头，下设3个重复，每个重复6头，分别饲左侧胴体腰椎处背最长肌肉样，称量、切碎、冷冻干喂不同的能量水平Et粮。试验分15～30、30～60、60一燥、制成风干样。用石油醚对脂肪包采用索氏抽提收稿日期：2014一O1—14：修回日期：2014—03—21法(GB5512—85)抽提，85℃抽提26h。资助项目：云南省自然科学基金重点项目(2005C0008Z)1．4总RNA提取取肌肉组织100mg，用异硫氰酸作者简介：李永能(1976一)，男，云南师宗人，硕士，副教授，主要胍一酚一氯仿一步法提取总RNA(TRIZOLrea

7、gent购从事动物分子营养与代谢调控研究，E—mail：lyn77@vip．sina．corn于北京天根生化科技有限公司)，总RNA充分溶解后通讯作者：黄英，E—mail：hying5@sina．aom；苏子峰，E—mail：Suz—ifeng88@163．com用紫外分光光度计(260nm)(BIOMATE3S，美国)测中国蠡牧露志。蘑辫濑·NutritionandFeedstuffs2f~4母罄哿笫’S期表1日粮营养成分定总RNA浓度与纯度，D瑚呻1／D瑚为1．8～2．0，并经1％琼脂糖凝胶电泳鉴定其完整性。1．5实时定量PCR根据所测定的浓度，

8、各取2IxgRNA进行反转录，反应体系为20L，其中含有0．5mmol／LdNTP2IxL、12~mol／L