毕业论文 - - microRNA对肉牛肌内脂肪沉积相关基因表达的调控作用研究

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1、毕业论文(2015届本科)题目:microRNA对肉牛肌内脂肪沉积相关基因表达的调控作用研究学院:畜牧兽医学院专业:动物科学姓名:指导教师:完成日期:2015年5月6日目录摘要1Abstract2前言31实验材料与方法91.1试验动物与来源91.1.1血液样品91.1.2肌肉组织样品91.2试验所需药品和试剂91.3主要仪器设备91.4主要试剂的配制101.5DNA的提取101.5.1肌肉组织DNA的提取101.5.2DNA浓度和纯度的检测111.6引物设计121.7基因目的片段的扩张121.7.1使用TaKaRaTaq酶试剂盒在冰

2、盒上配置25μL体系反应液121.7.2PCR反应程序121.8序列测定与SNP(单核苷酸突变)定位132结果与分析142.1筛选得到的mi-RNA的特点142.2miRNA的分离与靶标结合的特点152.2.1突变前结合的miRNA152.2.2突变后结合的miRNA173结论与讨论20参考文献21致谢24沈阳农业大学学士学位论文摘要为了研究microRNA对肉牛肌内脂肪沉积相关基因表达的调控作用,本文通过对辽育白牛肌肉组织DNA的提取、DNA浓度和纯度的检测、基因目的片段的扩张、序列测定与SNP定位这些实验,得到了MiRNA的分离

3、与靶标结合的特点,筛选得到的MiRNA的特点等。实验结果表明,利用在线软件查找牛的miRNA,牛的靶标miRNA库包含1608个相关miRNA,用miRBASE软件将HFABP基因与牛的miRNA结合情况分析后发现6个突变前结合的miRNA包括bta-miR-212MIMAT0009264,bta-miR-411aMIMAT0009312,bta-miR-2370-3pMIMAT0011915,bta-miR-30fMIMAT0009282,bta-miR-3604MIMAT0016939,bta-miR-2468MIMAT0012

4、058,,6个突变后结合的miRNA包括bta-miR-421MIMAT0009314,bta-miR-484MIMAT0003535,bta-miR-2355-5pMIMAT0011891,bta-miR-2413MIMAT0011975,bta-miR-2461-3pMIMAT0012048,bta-miR-2474MIMAT0012065。筛选得到的RNA测序后通过基因序列与波峰的比对发现,在H-FABP基因3′-UTR区发现了1个差异位点,170bp位点A/T的突变。microRNA广泛存在于单细胞和多细胞的真核生物中,并在

5、真核基因表达调控中有着重要的作用,它对信号传导、细胞代谢和凋亡、肌细胞生成、病毒感染和癌症等方面影响显著,因此受到了越来越多的关注。本文对microRNA分子及其对动物肌肉发育和脂质代谢的调控以及在一些动物疾病中的作用等进行研究,为今后动物microRNA的研究提供理论依据。关键词:MicroRNA;肌内脂肪;基因;肉牛第23页共27页沈阳农业大学学士学位论文AbstractInordertostudymicroRNAonbeefintramuscularfatdepositionrelatedtotheregulationofge

6、neexpression,thepaperextractionLiaoYuwhitecowDNAofmuscletissue,DNAconcentrationandpuritytesting,thepurposeoftheexpansionofgenefragments,sequencingandSNPlocatetheseexperiments,MiRNAgotseparatedandtargetbindingcharacteristics,featuresscreenedMiRNAlike.Experimentalresults

7、showthattheuseofonlinesoftwaretofindcattlemiRNA,cattletargetmiRNAlibrarycontains1608relatedmiRNA,withmiRBASEsoftwareHFABPmiRNAgenesandcattlecombinedanalysisfoundthatafterthefirstsixmutationsboundmiRNAincludebta-miR-212MIMAT0009264,bta-miR-411aMIMAT0009312,bta-miR-2370-

8、3pMIMAT0011915,bta-miR-30fMIMAT0009282,bta-miR-3604MIMAT0016939,bta-miR-2468MIMAT0012058,,aftersixmutationsboundmiRNA

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