ampk对肉牛脂肪沉积的影响及其基因多态性研究

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1、分类号——ICS学校代码10136学号200900104委薹’～茎一§复蒙吉民燕大学硕士学位论文AMPK对肉牛脂肪沉积的影响及其基因多态性研究TheEffectofAMPKonBeefFatDepositionandtheStudyofitsGenePolymorphisms申请人：高丽南学科专业：动物营养与饲料科学研究方向：家畜环境卫生学学位类别：学术学位指导教师：王思珍教授论文提交日期：二。一二年五月摘要本研究选取体重为250kg左右，平均年龄为10月龄的杂交肉牛85头，其中西杂牛35头、利杂牛26头、夏杂牛24头。每个

2、遗传基础肉牛设低、中、高3个日粮营养水平，育肥期为10个月，试验结束后对与肉牛脂肪沉积相关的血液指标和酶活性进行了监测；同时应用荧光定量RT-PCR方法，观测了不同遗传基础条件下，不同组织器官中磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)表达的差异；还检测了AMPKa2亚基的多态性，探讨AMPK活性、表达、遗传多态性与脂肪沉积的关系。试验结果表明：营养与遗传对血液中各生化指标都不存在显著互作效应。从营养上看，高营养时AMPK活性和高密度脂蛋白(HDL)含量较低，而乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量都随着

3、营养的提高而增加；从遗传上看，利杂牛AMPK、ACC活性和HDL含量较高，夏杂牛TG、TC含量较高；营养与遗传对HMGR(羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶)活性和葡萄糖(GLU)含量都没有显著影响。AMPK活性与HDL含量呈正相关，与ACC、HMGR活性和TG、TC、GLU含量呈负相关。可见，高营养会降低AMPK活性，而遗传基础的不同也影响AMPK活性，AMPK活性与脂肪代谢密切相关，影响肉牛脂肪沉积。高营养可提高机体内各组织器官AMPKa2的表达量，而且具有组织差异性，为颈肌>背脂>心肌>肝脏。从遗传上看，利杂牛组织器官中AM

4、PKa2的表达更高。背脂中AMPKa2的表达与肌内脂肪含量的相关性较强，并且存在营养和遗传基础的差异性，高营养利杂牛背脂中AMPKa2的表达与大理石花纹显著相关，背脂中AMPKa2的表达与背标厚相关性不显著。心肌．、肝脏中为高营养组AMPKa2的表达量与其周围脂肪含量相关更显著。西杂牛、利杂牛、夏杂牛均在AMPKa2基因第4外显子55513bp处发生C_T突变，三种肉牛群体都属于中度多态；三种肉牛均在第6外显子59233bp处发生A—G突变，西杂牛和夏杂牛都属于中度多态，利杂牛属于低度多态。而三种肉牛AMPKa2基因第4外显

5、子和第6外显子不同基因型的肉牛脂肪含量、体重、屠宰率等性状都不存在显著差异。由以上结果可以得出：AMPK基因与动物机体脂肪沉积有重要联系，对提高饲料利用率，改善肉牛生长性能，提高肉牛胴体品质具有一定意义。关键词：AMPK；营养水平；遗传；脂肪沉积；肉牛TheEffectofAMPKonBeefFatDepositionandtheStudyofitsGenePolymorphismsAbstractEighty—fivecattlewereusedinthestudy,including35Simmentalcattle，2

6、6Limousincattleand24Charolaiscattle．Therewerethreediets，includinglow，middleandhighnutritionandeachbreedwasfedrespectivelyfor10months．Aftertheexperiment，thebloodparametersandenzymeactivitieswhichwerewiththefatdepositionweredetected．Atthesametime，usingquantitativeRT-

7、PCRmethod，thedifferencesofAMPKexpressionindifferenttissuesoforganswereobservedatthedifferentgeneticconditions．ItwasdetectedthatAMPKa2genepolymorphism．TherelationshipswerediscussedbetweenAMPKactivity，AMPKa2geneexpressionandpolymorphismwithfatdeposition．resultsshowed

8、that：nutritionandbreedinthebloodindicatorswerenotsignificantinteraction．Fromnutritientpointofview：whennutritientlevelwashigh，AMPKactivityandHDLco