两种大鼠哮喘模型的比较.pdf

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1、中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2014Aug；30(8)：1175—8。1175·网络出版时间：2014—7—1016：51网络出版地址：htlp：／／www．cnki．neWkcms／doWlO．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．028．html◇实验方法学◇两种大鼠哮喘模型的比较王雅娟，赵一婷，戴斌，汤慧芳，蒋雅丽，汪雪峰，陈季强(1．安徽中医药大学中西医结合临床学院，安徽合肥230038；2．安徽省妇幼保健院检验科，安徽合肥23

2、0001；3．铜陵市立医院，安徽铜陵244000；4．浙江大学医学院，浙江杭州310058；5．浙江省新华医院，浙江杭州330100)doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．028检测的分子生物学试剂常见，作为复制哮喘模型的实验动物文献标志码：A文章编号：1001—1978(2014)08—1175—04具有独特的优点。其中，sD大鼠的应用约占到使用频率的中国图书分类号：R-332；R322．35；R363-332；R364．5；60％左右。R562．25目前，常用于复

3、制大鼠哮喘模型的方法是用10％的氢摘要：目的观察OVA致敏、pertussis致敏与二者共同致敏氧化铝凝胶作为佐剂，将卵白蛋白(ovalbumin，OVA)溶于佐这3种致敏方法对大鼠哮喘模型复制的影响，以便确定一种剂制成致敏用溶剂，于腹腔或多点皮下注射致敏大鼠，再以较成功的哮喘大鼠模型。方法用3种方法分别致敏大鼠，OVA的生理盐水溶液进行雾化攻击复制哮喘大鼠模抗原攻击后，用Medlab生物信号采集处理系统记录仪记录型“]。另有报道，使用OVA氢氧化铝凝胶溶液腹腔注射甲酰胆碱激发的气道高反应性。行支气管肺

4、泡灌洗和腹腔与百日咳杆菌(pertussis)肌内注射共同致敏，再以OVA的生灌洗，计数支气管肺泡灌洗液中细胞总数并分类，观察肺组理盐水溶液进行雾化攻击造成的大鼠哮喘模型’”，这种织病理改变。结果OVA+pertussis共同致敏、OVA单独致新方法与传统的OVA单独致敏有何区别?百日咳杆菌加强敏和pertussis单独致敏都可引起一定的大鼠肺功能下降、炎致敏是否能增加模型复制的成功率?百日咳杆菌单独致敏症细胞浸润增加以及肺组织病理改变，OVA+pertussis共同和OVA有区别吗?为了解决这些问题，

5、找到一种更为成功的造模方法，我们分别使用了OVA单独致敏、pertussis单独致敏效果优于OVA单独致敏和pertussis单独致敏。结论OVApertussis共同致敏，再进行雾化攻击是一种比较成功致敏和OVA+pertussis共同致敏这3种方法致敏大鼠，再进的哮喘大鼠模型。行OVA生理盐水溶液雾化攻击，观察以上3种致敏方法所复制的大鼠哮喘模型的差别。关键词：哮喘；卵白蛋白；百日咳杆菌；支气管高反应性；炎1材料与方法1．1试剂卵白蛋白(美国Sigma产品)；百日咳杆菌(购自症；大鼠上海生物制品研究

6、所)；氨甲酰胆碱(Methacholine，MCh，Sig-ma公司，批号：79H1505)；其余所用试剂均为国产分析纯。支气管哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性1．2实验动物Sprague—Dawley大鼠，清洁级，6，160～炎症性疾病，其临床的典型特征有气道炎症、气道重塑及气180g，由上海西普尔一必凯实验动物有限公司提供，动物合道高反应性。目前，用来制备支气管哮喘模型用于实验研究格证号：Scxk(沪)2008-00t6。的动物有很多，包括大鼠、小鼠、豚鼠等，其中豚鼠由于其过1．3仪器雾化吸

7、人器(BARI，MASTER，Germany)；Medlab敏反应易于激发，且与人类相近成为最为常见的实验动物。生物信号采集处理系统(V5．0，南京美易公司)；磁力搅拌器但使用豚鼠复制哮喘模型的缺点在于个体差异较大、难饲(JB4，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司)；冷冻离心机养、激发时死亡率高，并且用于检测的相应的分子生物学材(EppendofCentrifuge5840R，Germany)；显微镜(Olympus料少见，获取比较困难。因此，近年来研究人员更倾向于采BXS1，Japan)。用大鼠制作哮喘

8、模型。大鼠来源广、繁殖快，激发后能产生1．4动物处理大鼠分为4组，每组12只：①正常对照组；和人类较为相似的过敏反应，且死亡率较豚鼠低，并且用于~)OVA单独致敏组；③pertussis单独致敏组；④OVA+per—tussis共同致敏组。致敏用OVA溶液是将OVA溶于新鲜配收稿Et期：2014—04—03，修回Ft期：2014—05—03制的10％氢氧化铝凝胶内，充分搅拌混匀，OVA的终浓度为基金项目：安徽省科技计划年度科研项目(No13