巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对小鼠乳腺癌4T1细胞迁移及血管内皮生长因子A表达的影响.pdf

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1、肿瘤研究与临床2014年8月第26卷第8期CancerResearchandClinic，August2014，Vo1．26，No．8·论著·巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子对小鼠乳腺癌4T1细胞迁移及血管内皮生长因子A表达的影响古晓东李飞栋王玉【摘要】目的探讨巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)和粒细胞．巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)对乳腺癌4T1细胞迁移及血管内皮生长因子(VEGF)一A表达的影响。方法分别用5、10ng／mlM—CSF和GM．CSF处理小鼠乳腺癌4T1细

2、胞株，采用实时荧光定量PCR方法检测4T1细胞中细胞因子VEGF—AmRNA表达量的变化。划痕实验和Transwell实验检测用5ng／mlM．CSF、5ng／mlGM—CSF和10ng／mlVEGF—A对4T1细胞迁移和侵袭能力的影响。结果经5、lOng／mlM—CSF分别处理4T1细胞后VEGF．AmRNA在12h和24h的相对表达量分别为17．81±2．49和17．48±5．43、5．15±2．59和5．45±4．28；经5、l0ng／mlGM—CSF分别处理4rr1细胞后VEGF—AmR

3、NA在12h和24h的相对表达量分别为9．77±2．39和7．61±2．80、6．53±2．41和6．30±2．89。与无细胞因子处理的对照组相比，除10ng／mlGM—CSF处理4T1细胞24h组VEGF—AmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0．05)外，其他各组VEGF—AmRNA表达水平差异均有统计学意义(均P<0．05)，处理细胞12h时VEGF．A的表达较24h时更明显(均P<0．01)。划痕实验显示M．CSF和GM．CSF可促进4T1细胞的迁移，但VEGF．A对4T1细胞的迁移无

4、影响。Transwell实验发现，用M—CSF、GM．CSF和VEGF—A处理的实验组中4T1细胞的穿膜数量多于无细胞因子处理的对照组(均P<0．05)。结论M—CSF和GM—CSF可促进小鼠乳腺癌4T1细胞迁移及VEGF．A的表达。【关键词】乳腺肿瘤；4T1细胞株；巨噬细胞集落刺激因子；粒．巨噬细胞集落刺激因子；血管内皮生长因子A；细胞迁移Effect0fM·CSFandGM．CSFonmigrationandVEGF·Aexpressionofbreastcancercellline4T1G

5、uXiaodong．LiFeidong,WangYu．DepartmentofBreastRadiotherapy,ShanxiCancerHospital,Taiyuan030013,ChinaCorrespondingauthor：LiFeidong,Emaihlifeidong@hotm~1．com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofM·CSFandGM-CSFonmigrationandexpressionofVEGF．Ainbreast

6、cancercellline4T1．MethodsRca1一timePCRwasusedtodetectVEGF—AmRNAexpressionin4T1cellstreatedby5ng／mlor10ng／mlM—CSForGM-CSF．Abilityofmigrationandmetastasisof4T1cellswereanalyzedbyscratchandTranswellassays．ResultsTherelativeexpressionofVEGF—AmRNAat12hand2

7、4hin4T1cellstreatedby5ng／mlor10ng／mlM—CSFwere17．81±2．49and17．48±5．43，5．15~2．59and5．45~4．28，respectively。whilethosetreatedbyGM—CSFwere9．77~2．39and7．61±2．806．53~2．41and6．30~2．89．respectively．M—CSFandGM—CSFcanpromotetheexpressionofVEGF．Ain4T1cellsfP<0．0

8、5)．TherelativeexpressionofVEGF—Awashigherin4T1cellstreatedfor12hthanthatfor24h(P<0．01)．M—CSF，GM—CSFandVEGF—Acanpromotemetastasisof4T1cells(allP<0．05)，whereasnogrossmigrationof1ceilswasshowedbyVEGF．Atreatment．ConclusionM．CSFandCM—CSFcanpromotethemigra